Preskoči na vsebino
Celice HuH7
Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Mesto metastaze
Hepatom
Sinonimi
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Dokumenti

Celice HuH7

Cell line · Številka izdelka 300156

Celice HuH-7 so vrsta epitelijsko podobne, tumorogene celične linije, ki je bila prvotno pridobljena iz jetrnega tumorja pri 57-letnem japonskem moškem leta 1982. Človeški jet...

€650.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice HuH-7 so vrsta epitelijskim celicam podobne, tumorogene celične linije, ki je bila prvotno vzeta iz jetrnega tumorja 57-letnega Japonca leta 1982. Celična linija HuH-7, pridobljena iz človeškega hepatoma, in njeni derivati se pogosto uporabljajo v raziskavah kot priročen poskusni nadomestek za primarne hepatocite. Zlasti so bile koristne pri raziskavah hepatitisa C in se uporabljajo kot gostiteljske celice za razmnoževanje virusa in vitro. Celice HuH-7 so imele ključno vlogo pri raziskavah hepatitisa C, zlasti pri razvoju zdravil. Pred letom 2005 raziskovalci niso mogli gojiti virusa hepatitisa C v laboratoriju, kar je oteževalo testiranje potencialnih kandidatov za zdravila proti njemu.

Z uvedbo celične linije HuH-7 se je to spremenilo. Te celice so zelo dovzetne za razmnoževanje virusa hepatitisa C, zato so idealne za testiranje in vitro. Z uporabo celic HuH-7 so raziskovalci lahko preverili kandidate za zdravila proti laboratorijsko gojenemu hepatitisu C, kar je odprlo pot razvoju novih zdravil za boj proti virusu. Za razliko od drugih uveljavljenih človeških hepatomskih celičnih linij se lahko celice HuH-7 razmnožujejo v kemično določenem gojišču, ki namesto seruma vsebuje sledove selena. To omogoča sistematične študije in vitro učinkov različnih spojin na njihovo rast in presnovo.

Tkivo
Jetra
Bolezen
Hepatocelularni karcinom
Mesto metastaze
Hepatom
Sinonimi
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših.
Čas podvojitve
48 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
HuH7 (kataloška številka Cytion 300156)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Negativna za HPV, HCV in HIV.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 do 2 x 104 celic/cm2 med rutinsko celično kulturo
Obnova tekočine
Vsakih 3 dni
Obnova po odtaljevanju
Začnite kultiviranje z 2 do 3 x 104 celicami/cm2. Celice se bodo obnovile v 24 do 48 urah.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
57 let
Etnična pripadnost
Japonski