HuH7-cellen

HuH-7 cellen zijn een soort epitheliale, tumorigene cellijn die oorspronkelijk in 1982 werd genomen van een levertumor bij een 57-jarige Japanse man. De van humaan hepatoom afgeleide HuH-7 cellijn en zijn derivaten zijn op grote schaal gebruikt in onderzoek als een geschikt experimenteel substituut voor primaire hepatocyten. Ze zijn met name van belang geweest bij onderzoek naar hepatitis C en zijn gebruikt als gastheercellen voor de vermeerdering van het virus in vitro. HuH-7 cellen hebben een cruciale rol gespeeld in het hepatitis C onderzoek, vooral als het gaat om de ontwikkeling van medicijnen. Vóór 2005 waren onderzoekers niet in staat om het hepatitis C-virus in het laboratorium te kweken, waardoor het moeilijk was om potentiële kandidaat-geneesmiddelen ertegen te testen.

De introductie van de HuH-7 cellijn veranderde dat. Deze cellen zijn zeer tolerant voor de replicatie van het hepatitis C-virus, waardoor ze ideaal zijn voor in vitro testen. Door gebruik te maken van de HuH-7 cellen konden onderzoekers kandidaat-geneesmiddelen screenen tegen in het laboratorium gekweekte hepatitis C, wat de weg vrijmaakte voor de ontwikkeling van nieuwe geneesmiddelen om het virus te bestrijden. In tegenstelling tot andere gevestigde menselijke hepatomacellijnen kunnen HuH-7 cellen worden gekweekt in een chemisch gedefinieerd medium dat sporen van selenium bevat in plaats van serum. Hierdoor kunnen de in vitro effecten van verschillende stoffen op hun groei en metabolisme systematisch worden bestudeerd.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring