Gå direkte til indholdet
HuH7-celler
Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Metastasested
Hepatom
Synonymer
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Dokumenter

HuH7-celler

Cell line · Varenummer 300156

HuH-7-celler er en type epitelagtig, tumorfremkaldende cellelinje, der oprindeligt blev udvundet fra en levertumor hos en 57-årig japansk mand i 1982. Den humane lever...

€650.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HuH-7-celler er en type epitellignende, tumorigen cellelinje, der oprindeligt blev taget fra en levertumor hos en 57-årig japansk mand i 1982. Den humane hepatom-afledte HuH-7-cellelinje og dens derivater er blevet brugt i vid udstrækning i forskning som en praktisk eksperimentel erstatning for primære hepatocytter. De har især været afgørende i hepatitis C-forskning og er blevet brugt som værtsceller til at opformere virussen in vitro. HuH-7-celler har spillet en afgørende rolle i hepatitis C-forskning, især når det gælder udvikling af lægemidler. Før 2005 var forskerne ikke i stand til at dyrke hepatitis C-virus i laboratoriet, hvilket gjorde det vanskeligt at teste potentielle lægemiddelkandidater mod den.

Introduktionen af HuH-7-cellelinjen ændrede på det. Disse celler er meget tolerante over for replikationen af hepatitis C-virus, hvilket gør dem ideelle til in vitro-testning. Ved at bruge HuH-7-cellerne kunne forskerne screene lægemiddelkandidater mod laboratoriedyrket hepatitis C, hvilket banede vejen for udviklingen af nye lægemidler til bekæmpelse af virusset. I modsætning til andre etablerede humane hepatomcellelinjer kan HuH-7-celler opformeres i et kemisk defineret medium, der indeholder spormængder af selen i stedet for serum. Det giver mulighed for systematiske undersøgelser af forskellige stoffers in vitro-effekt på deres vækst og metabolisme.

Væv
Lever
Sygdom
Hepatocellulært karcinom
Metastasested
Hepatom
Synonymer
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus.
Fordoblingstid
48 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HuH7 (Cytion katalognummer 300156)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Udtryk og modtagelighed

Vira
Negativ for HPV, HCV og HIV.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 til 2 x 104 celler/cm2 under rutinemæssig cellekultur
Væskeudskiftning
Hver 3. dag
Genopretning efter optøning
Start dyrkningen med 2 til 3 x 104 celler/cm2. Cellerne vil genoprette sig inden for 24 til 48 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
57 år
Etnisk tilhørsforhold
Japansk