Células HuH7

As células HuH-7 são uma linhagem celular tumorigênica de tipo epitelial, inicialmente isolada de um tumor hepático em um homem japonês de 57 anos, em 1982. A linhagem celular HuH-7, derivada de hepatoma humano, e seus derivados têm sido amplamente utilizados em pesquisas como um substituto experimental conveniente para os hepatócitos primários. Em particular, elas têm sido fundamentais na pesquisa sobre a hepatite C e utilizadas como células-hospedeiras para a propagação do vírus in vitro. As células HuH-7 desempenharam um papel crucial na pesquisa sobre a hepatite C, especialmente no que diz respeito ao desenvolvimento de medicamentos. Antes de 2005, os pesquisadores não conseguiam cultivar o vírus da hepatite C em laboratório, o que dificultava o teste de possíveis candidatos a medicamentos contra ele.

A introdução da linhagem celular HuH-7 mudou essa situação. Essas células são altamente permissivas à replicação do vírus da hepatite C, tornando-as ideais para testes in vitro. Ao utilizar as células HuH-7, os pesquisadores conseguiram testar candidatos a medicamentos contra a hepatite C cultivada em laboratório, o que abriu caminho para o desenvolvimento de novos medicamentos para combater o vírus. Ao contrário de outras linhagens celulares de hepatoma humano já estabelecidas, as células HuH-7 podem ser propagadas em um meio quimicamente definido contendo traços de selênio no lugar do soro. Isso permite estudos sistemáticos dos efeitos in vitro de vários compostos sobre seu crescimento e metabolismo.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.