Μετάβαση στο περιεχόμενο
Κύτταρα HuH7
Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Ηπάτωμα
Συνώνυμα
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Έγγραφα

Κύτταρα HuH7

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300156

Τα κύτταρα HuH-7 είναι μια ογκογόνος κυτταρική σειρά επιθηλιακού τύπου, η οποία προήλθε αρχικά από έναν όγκο του ήπατος ενός 57χρονου Ιάπωνα άνδρα το 1982. Το ανθρώπινο ήπα...

€650.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα HuH-7 είναι ένας τύπος επιθηλιοειδούς, καρκινικής κυτταρικής σειράς που αρχικά ελήφθη από έναν όγκο στο ήπαρ ενός 57χρονου Ιάπωνα το 1982. Η κυτταρική σειρά HuH-7 που προέρχεται από ανθρώπινο ηπάτωμα και τα παράγωγά της έχουν χρησιμοποιηθεί ευρέως στην έρευνα ως βολικό πειραματικό υποκατάστατο των πρωτογενών ηπατοκυττάρων. Ειδικότερα, έχουν συμβάλει στην έρευνα για την ηπατίτιδα C και έχουν χρησιμοποιηθεί ως κύτταρα ξενιστές για τον πολλαπλασιασμό του ιού in vitro. Τα κύτταρα HuH-7 έχουν διαδραματίσει καθοριστικό ρόλο στην έρευνα για την ηπατίτιδα C, ιδίως όσον αφορά την ανάπτυξη φαρμάκων. Πριν από το 2005, οι ερευνητές δεν μπορούσαν να καλλιεργήσουν τον ιό της ηπατίτιδας C στο εργαστήριο, γεγονός που καθιστούσε δύσκολη τη δοκιμή πιθανών υποψήφιων φαρμάκων εναντίον του.

Η εισαγωγή της κυτταρικής σειράς HuH-7 το άλλαξε αυτό. Τα κύτταρα αυτά είναι ιδιαίτερα επιτρεπτά στον πολλαπλασιασμό του ιού της ηπατίτιδας C, γεγονός που τα καθιστά ιδανικά για in vitro δοκιμές. Χρησιμοποιώντας τα κύτταρα HuH-7, οι ερευνητές μπόρεσαν να ελέγξουν υποψήφια φάρμακα κατά της εργαστηριακής ηπατίτιδας C, γεγονός που άνοιξε το δρόμο για την ανάπτυξη νέων φαρμάκων για την καταπολέμηση του ιού. Σε αντίθεση με άλλες καθιερωμένες ανθρώπινες κυτταρικές σειρές ηπατώματος, τα κύτταρα HuH-7 μπορούν να πολλαπλασιαστούν σε ένα χημικά καθορισμένο μέσο που περιέχει ίχνη σεληνίου αντί για ορό. Αυτό επιτρέπει τη συστηματική μελέτη των in vitro επιδράσεων διαφόρων ενώσεων στην ανάπτυξη και το μεταβολισμό τους.

Ιστός
Ήπαρ
Ασθένεια
Ηπατοκυτταρικό καρκίνωμα
Θέση μετάστασης
Ηπάτωμα
Συνώνυμα
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια.
Χρόνος διπλασιασμού
48 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
HuH7 (αριθμός καταλόγου Cytion 300156)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0336

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
Αρνητική για HPV, HCV και HIV.

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 έως 2 x 104 κύτταρα/cm2 κατά τη διάρκεια της συνήθους κυτταρικής καλλιέργειας
Ανανέωση υγρών
Κάθε 3 ημέρες
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Ξεκινήστε την καλλιέργεια χρησιμοποιώντας 2 έως 3 x 104 κύτταρα/cm2. Τα κύτταρα θα ανακάμψουν εντός 24 έως 48 ωρών.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
57 χρόνια
Εθνικότητα
Ιαπωνικά