_(1).jpg)
- Chusteczka
- Wątroba
- Choroba
- Rak wątrobowokomórkowy
- Miejsce przerzutów
- Wątrobiak
- Synonimy
- HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39
Dokumenty
Komórki HuH7
Cell line · Numer produktu 300156
Komórki HuH-7 to linia komórkowa o charakterze nabłonkowym i zdolności do wywoływania nowotworów, pobrana po raz pierwszy w 1982 roku z guza wątroby 57-letniego Japończyka. Ludzka wątroba...
Dostosowanie / Zalecenia
- Komórki HuH7Cell line€650.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Komórki HuH-7 są typem nabłonkowej, nowotworowej linii komórkowej, pierwotnie pobranej z guza wątroby u 57-letniego Japończyka w 1982 roku. Pochodząca z ludzkiego wątrobiaka linia komórkowa HuH-7 i jej pochodne były szeroko stosowane w badaniach jako wygodny eksperymentalny substytut pierwotnych hepatocytów. W szczególności odegrały one kluczową rolę w badaniach nad wirusowym zapaleniem wątroby typu C i były wykorzystywane jako komórki gospodarza do namnażania wirusa in vitro. Komórki HuH-7 odegrały kluczową rolę w badaniach nad wirusowym zapaleniem wątroby typu C, zwłaszcza jeśli chodzi o opracowywanie leków. Przed 2005 rokiem naukowcy nie byli w stanie hodować wirusa zapalenia wątroby typu C w laboratorium, co utrudniało testowanie potencjalnych kandydatów na leki przeciwko niemu.
Wprowadzenie linii komórkowej HuH-7 zmieniło ten stan rzeczy. Komórki te są wysoce podatne na replikację wirusa zapalenia wątroby typu C, co czyni je idealnymi do testów in vitro. Wykorzystując komórki HuH-7, naukowcy byli w stanie badać kandydatów na leki przeciwko laboratoryjnie wyhodowanemu wirusowi zapalenia wątroby typu C, co utorowało drogę do opracowania nowych leków zwalczających wirusa. W przeciwieństwie do innych uznanych linii komórkowych ludzkiego wątrobiaka, komórki HuH-7 mogą być rozmnażane w chemicznie zdefiniowanej pożywce zawierającej śladowe ilości selenu zamiast surowicy. Pozwala to na systematyczne badania wpływu in vitro różnych związków na ich wzrost i metabolizm.
- Chusteczka
- Wątroba
- Choroba
- Rak wątrobowokomórkowy
- Miejsce przerzutów
- Wątrobiak
- Synonimy
- HuH-7
- HUH-7
- Huh-7
- Huh7
- HUH7
- HUH7.0
- JTC-39
- Japanese Tissue Culture-39
02Klasyfikacja
- Organizm
- Człowiek
- Seks
- Mężczyzna
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Podobny do nabłonka
- Nowotworotwórczy
- Tak, u nagich myszy.
- Czas podwojenia
- 48 godzin
04Identyfikatory
- Źródło
- HuH7 (numer katalogowy Cytion 300156)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0336
05Ekspresja i podatność
- Wirusy
- Ujemny wynik testów na HPV, HCV i HIV.
06Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Gęstość wysiewu
- 1 do 2 x 104 komórek/cm2 podczas rutynowej hodowli komórkowej
- Odnawianie płynów
- Co 3 dni
- Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
- Rozpocznij hodowlę, stosując 2 do 3 x 104 komórek/cm2. Komórki odzyskają żywotność w ciągu 24 do 48 godzin.
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
08Darczyńca
- Wiek dawcy
- 57 lat
- Pochodzenie etniczne
- Japoński
09Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak