Премини към съдържанието
Клетки HuH7
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Място на метастазите
Хепатом
Синоними
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Документи

Клетки HuH7

Cell line · Номер на продукта 300156

Клетките HuH-7 са вид епителиоподобна, туморогенна клетъчна линия, първоначално изолирана от тумор на черния дроб при 57-годишен японски мъж през 1982 г. Човешкият хепа...

€650.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките HuH-7 са вид епителноподобна туморогенна клетъчна линия, първоначално взета от чернодробен тумор на 57-годишен японец през 1982 г. Клетъчната линия HuH-7, получена от човешки хепатом, и нейните производни са широко използвани в научните изследвания като удобен експериментален заместител на първичните хепатоцити. По-специално, те са от съществено значение за изследванията на хепатит С и се използват като клетки-гостоприемници за размножаване на вируса in vitro. Клетките HuH-7 са изиграли решаваща роля в изследванията на хепатит С, особено когато става въпрос за разработване на лекарства. Преди 2005 г. изследователите не са могли да култивират вируса на хепатит С в лаборатория, което е затруднявало тестването на потенциални кандидати за лекарства срещу него.

Въвеждането на клетъчната линия HuH-7 промени това. Тези клетки са изключително възприемчиви към репликацията на вируса на хепатит С, което ги прави идеални за in vitro тестове. Използвайки клетките HuH-7, изследователите успяха да направят скрининг на кандидати за лекарства срещу лабораторно отгледан хепатит С, което проправи пътя за разработването на нови лекарства за борба с вируса. За разлика от други установени човешки хепатомни клетъчни линии, клетките HuH-7 могат да се размножават в химически определена среда, съдържаща следи от селен вместо серум. Това дава възможност за систематични изследвания на in vitro ефектите на различни съединения върху техния растеж и метаболизъм.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином
Място на метастазите
Хепатом
Синоними
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при голи мишки.
Време за удвояване
48 часа

04Идентификатори

Източник
HuH7 (каталожен номер 300156 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0336

05Проява и предразположеност

Вируси
Отрицателни за HPV, HCV и HIV.

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,0 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 до 2 x 104 клетки/cm2 по време на рутинна клетъчна култура
Обновяване на течността
На всеки 3 дни
Възстановяване след размразяване
Започнете култивирането, като използвате 2 до 3 x 104 клетки/cm2. Клетките ще се възстановят в рамките на 24 до 48 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
57 години
Етническа принадлежност
Японски