Cellule HuH7

Le cellule HuH-7 sono un tipo di linea cellulare tumorale di tipo epiteliale, inizialmente prelevata da un tumore al fegato di un uomo giapponese di 57 anni nel 1982. La linea cellulare HuH-7 derivata da epatoma umano e i suoi derivati sono stati ampiamente utilizzati nella ricerca come comodo sostituto sperimentale degli epatociti primari. In particolare, sono state fondamentali nella ricerca sull'epatite C e utilizzate come cellule ospiti per la propagazione del virus in vitro. Le cellule HuH-7 hanno svolto un ruolo cruciale nella ricerca sull'epatite C, soprattutto per quanto riguarda lo sviluppo di farmaci. Prima del 2005, i ricercatori non erano in grado di coltivare il virus dell'epatite C in laboratorio, il che rendeva difficile testare potenziali farmaci contro di esso.

L'introduzione della linea cellulare HuH-7 ha cambiato le cose. Queste cellule sono altamente permissive alla replicazione del virus dell'epatite C, il che le rende ideali per i test in vitro. Utilizzando le cellule HuH-7, i ricercatori sono stati in grado di esaminare i candidati farmaci contro l'epatite C coltivata in laboratorio, aprendo così la strada allo sviluppo di nuovi farmaci per combattere il virus. A differenza di altre linee cellulari di epatoma umano consolidate, le cellule HuH-7 possono essere propagate in un terreno chimicamente definito contenente tracce di selenio al posto del siero. Ciò consente di studiare sistematicamente gli effetti in vitro di vari composti sulla loro crescita e sul loro metabolismo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia