Células HuH7

As células HuH-7 são um tipo de linha celular tumorigénica de tipo epitelial, inicialmente retirada de um tumor hepático de um homem japonês de 57 anos em 1982. A linha celular HuH-7 derivada do hepatoma humano e os seus derivados têm sido amplamente utilizados na investigação como um substituto experimental conveniente para os hepatócitos primários. Em particular, têm sido fundamentais na investigação da hepatite C e utilizadas como células hospedeiras para a propagação do vírus in vitro. As células HuH-7 têm desempenhado um papel crucial na investigação da hepatite C, especialmente no que diz respeito ao desenvolvimento de medicamentos. Antes de 2005, os investigadores não conseguiam cultivar o vírus da hepatite C em laboratório, o que dificultava o teste de potenciais candidatos a medicamentos contra o mesmo.

A introdução da linha de células HuH-7 veio alterar essa situação. Estas células são altamente permissivas à replicação do vírus da hepatite C, o que as torna ideais para testes in vitro. Ao utilizarem as células HuH-7, os investigadores puderam analisar candidatos a medicamentos contra a hepatite C cultivados em laboratório, o que abriu caminho para o desenvolvimento de novos medicamentos para combater o vírus. Ao contrário de outras linhas celulares de hepatoma humano estabelecidas, as células HuH-7 podem ser propagadas num meio quimicamente definido que contém vestígios de selénio em vez de soro. Este facto permite estudos sistemáticos dos efeitos in vitro de vários compostos no seu crescimento e metabolismo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia