Prejsť na obsah
Bunky HuH7
Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm
Miesto metastáz
Hepatóm
Synonymá
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Dokumenty

Bunky HuH7

Cell line · Číslo výrobku 300156

Bunky HuH-7 sú typom epitelových nádorotvorných buniek, ktoré boli pôvodne izolované z nádoru pečene u 57-ročného japonského muža v roku 1982. Ľudská pečeň...

€650.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky HuH-7 sú typom epiteliálnej, nádorovej bunkovej línie, ktorá bola pôvodne odobratá z nádoru pečene 57-ročného Japonca v roku 1982. Bunková línia HuH-7 odvodená od ľudského hepatómu a jej deriváty sa široko používajú vo výskume ako vhodná experimentálna náhrada primárnych hepatocytov. Najmä vo výskume hepatitídy C boli veľmi dôležité a používali sa ako hostiteľské bunky na rozmnožovanie vírusu in vitro. Bunky HuH-7 zohrávajú kľúčovú úlohu vo výskume hepatitídy C, najmä pokiaľ ide o vývoj liekov. Pred rokom 2005 výskumníci nemohli kultivovať vírus hepatitídy C v laboratóriu, čo sťažovalo testovanie potenciálnych kandidátov na lieky proti nemu.

Zavedenie bunkovej línie HuH-7 to zmenilo. Tieto bunky sú veľmi tolerantné voči replikácii vírusu hepatitídy C, čo z nich robí ideálne bunky na testovanie in vitro. Pomocou buniek HuH-7 mohli výskumníci testovať kandidátske lieky proti laboratórne vypestovanej hepatitíde C, čo otvorilo cestu k vývoju nových liekov na boj proti tomuto vírusu. Na rozdiel od iných zavedených bunkových línií ľudského hepatómu sa bunky HuH-7 môžu množiť v chemicky definovanom médiu obsahujúcom stopové množstvá selénu namiesto séra. To umožňuje systematické štúdie in vitro účinkov rôznych zlúčenín na ich rast a metabolizmus.

Tkanivo
Pečeň
Choroba
Hepatocelulárny karcinóm
Miesto metastáz
Hepatóm
Synonymá
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Tumorigenický
Áno, na nahých myšiach.
Doba zdvojnásobenia
48 hodín

04Identifikátory

Citácia
HuH7 (katalógové číslo Cytion 300156)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Prejav a náchylnosť

Vírusy
Negatívne na HPV, HCV a HIV.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 až 2 x 104 buniek/cm2 počas bežnej kultivácie buniek
Obnova kvapaliny
Každé 3 dni
Zotavenie po rozmrazení
Začnite kultiváciu s použitím 2 až 3 x 104 buniek/cm2. Bunky sa zotavia do 24 až 48 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
57 rokov
Etnická príslušnosť
Japonský