Skip to content
Tế bào HuH7
Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Metastatic site
Ung thư gan
Synonyms
HuH-7, HUH-7, Huh-7, Huh7, HUH7, HUH7.0, JTC-39, Japanese Tissue Culture-39

Documents

Tế bào HuH7

Cell line · Product number 300156

HuH-7 cells are a type of epithelial-like, tumorigenic cell line initially taken from a liver tumor in a 57-year-old Japanese male in 1982. The human hepa...

€650.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Tế bào HuH-7 là một dòng tế bào biểu mô tương tự, có khả năng gây ung thư, ban đầu được lấy từ một khối u gan của một nam giới Nhật Bản 57 tuổi vào năm 1982. Dòng tế bào HuH-7 có nguồn gốc từ ung thư gan người và các dòng tế bào con của nó đã được sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu như một thay thế thí nghiệm thuận tiện cho tế bào gan nguyên phát. Đặc biệt, chúng đã đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu viêm gan C và được sử dụng làm tế bào chủ để nhân lên virus trong ống nghiệm. Tế bào HuH-7 đã đóng vai trò quan trọng trong nghiên cứu viêm gan C, đặc biệt là trong phát triển thuốc. Trước năm 2005, các nhà nghiên cứu không thể nuôi cấy virus viêm gan C trong phòng thí nghiệm, khiến việc thử nghiệm các ứng viên thuốc tiềm năng trở nên khó khăn.

Sự ra đời của dòng tế bào HuH-7 đã thay đổi điều đó. Các tế bào này có khả năng cho phép virus viêm gan C nhân lên một cách hiệu quả, khiến chúng trở thành lựa chọn lý tưởng cho các thử nghiệm in vitro. Bằng cách sử dụng tế bào HuH-7, các nhà nghiên cứu có thể sàng lọc các ứng viên thuốc chống lại virus viêm gan C được nuôi cấy trong phòng thí nghiệm, mở đường cho việc phát triển các loại thuốc mới để chống lại virus. Khác với các dòng tế bào ung thư gan người đã được thiết lập khác, tế bào HuH-7 có thể được nuôi cấy trong môi trường hóa học được định nghĩa chứa lượng nhỏ selen thay vì huyết thanh. Điều này cho phép nghiên cứu hệ thống về tác động in vitro của các hợp chất khác nhau đối với sự phát triển và chuyển hóa của chúng.

Tissue
Gan
Disease
Ung thư tế bào gan
Metastatic site
Ung thư gan
Synonyms
  • HuH-7
  • HUH-7
  • Huh-7
  • Huh7
  • HUH7
  • HUH7.0
  • JTC-39
  • Japanese Tissue Culture-39

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Tương tự biểu mô
Tumourigenic
Đúng vậy, trên chuột không lông.
Doubling time
48 giờ

04Identifiers

Citation
HuH7 (Số catalog Cytion 300156)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0336

05Expression and susceptibility

Viruses
Âm tính với HPV, HCV và HIV.

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Seeding density
1 đến 2 × 10⁴ tế bào/cm² trong quá trình nuôi cấy tế bào thông thường.
Fluid renewal
Mỗi 3 ngày
Post-thaw recovery
Bắt đầu nuôi cấy với mật độ 2 đến 3 x 10⁴ tế bào/cm². Các tế bào sẽ phục hồi trong vòng 24 đến 48 giờ.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Donor age
57 năm
Ethnicity
Nhật Bản