Cellules HuH7

Les cellules HuH-7 constituent une lignée cellulaire tumorigène de type épithélial, initialement prélevée en 1982 sur une tumeur hépatique chez un homme japonais de 57 ans. La lignée cellulaire HuH-7, dérivée d’un hépatome humain, ainsi que ses dérivés, ont été largement utilisées en recherche comme substitut expérimental pratique aux hépatocytes primaires. Elles ont notamment joué un rôle déterminant dans la recherche sur l’hépatite C et ont servi de cellules hôtes pour la multiplication du virus in vitro. Les cellules HuH-7 ont joué un rôle crucial dans la recherche sur l’hépatite C, notamment en matière de développement de médicaments. Avant 2005, les chercheurs étaient incapables de cultiver le virus de l’hépatite C en laboratoire, ce qui rendait difficile l’évaluation de candidats-médicaments potentiels contre ce virus.

L’introduction de la lignée cellulaire HuH-7 a changé la donne. Ces cellules sont hautement permissives à la réplication du virus de l’hépatite C, ce qui les rend idéales pour les essais in vitro. Grâce aux cellules HuH-7, les chercheurs ont pu cribler des candidats-médicaments contre le virus de l’hépatite C cultivé en laboratoire, ouvrant ainsi la voie au développement de nouveaux médicaments pour lutter contre le virus. Contrairement à d’autres lignées cellulaires d’hépatome humain bien établies, les cellules HuH-7 peuvent être multipliées dans un milieu chimiquement défini contenant des traces de sélénium à la place du sérum. Cela permet de mener des études systématiques sur les effets in vitro de divers composés sur leur croissance et leur métabolisme.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.