HepG2-celler

HepG2-celler, en hepatoblastomcellelinje, er en hjørnestein i biologisk vitenskap, særlig innen leverkreftforskning. HepG2-cellelinjen ble først isolert i 1975 og først feilklassifisert som hepatocellulært karsinom, men senere ble HepG2-cellelinjens opprinnelse anerkjent som hepatoblastom, noe som avklarte mange år med vitenskapelig tvetydighet.

Humane levercellelinjer som HepG2 brukes ofte som in vitro-modeller for primære humane hepatocytter. Disse cellelinjene har fordeler som ubegrenset proliferasjon, stabil fenotype, lett tilgjengelighet og enkel manipulering. De viser imidlertid redusert uttrykk av enkelte metabolske funksjoner sammenlignet med primære hepatocytter. HepG2-celler, som stammer fra hepatocellulært karsinom, formerer seg raskt, har en epitellignende morfologi og utfører mange spesialiserte leverfunksjoner. Til tross for disse forskjellene er HepG2-celler mye brukt i studier av legemiddelmetabolisme og -toksisitet, takket være likheten med hepatocellulære karsinom- og hepatoblastomceller når det gjelder legemiddelmetabolisme og transportproteiner.

HepG2 er en human leverkreftcellelinje som ofte brukes i forskning, blant annet i studier av legemiddelmetabolisme og -toksisitet. En av begrensningene med Hepatoma HepG2-celler er imidlertid at de har et endret uttrykk av visse leverspesifikke funksjoner, blant annet cytokrom P450-enzymer. Cytokrom P450-enzymer er essensielle for metabolismen av xenobiotika (fremmede forbindelser som legemidler og kreftfremkallende stoffer) i leveren. Endret eller redusert uttrykk av disse enzymene i HepG2-celler kan påvirke deres evne til å modellere metabolismen og eliminasjonen av xenobiotika, noe som er et kritisk aspekt ved leverens funksjon.

HepG2-cellelinjen bidrar, sammen med andre hepatomcellelinjer som Hep3B og HepaRG-cellelinjen, til en bredere forståelse av humane leverkarsinomceller. Cellelinjen skiller seg ut ved sin allsidighet, og er et optimalt valg for generering av stabile cellelinjer, transfeksjonsstudier, legemiddelmetabolisme og hepatotoksisitetsstudier. HepG2-cellelinjen er dessuten sentral i en rekke bruksområder, fra 3D-cellekultur til screening med høy kapasitet og toksikologi.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring