Tartalomra ugrás
HepG2 sejtek
Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Szinonimák
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

Dokumentumok

HepG2 sejtek

Cell line · Termékszám 300198

A HepG2 sejtek, egy hepatoblastoma sejtvonal, a biológiai tudományok, különösen a májrák-kutatás egyik alapköve. A HepG2 sejtvonalat először izolálták...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A HepG2 sejtek, egy hepatoblasztóma sejtvonal, a biológiai tudományok, különösen a májrák kutatásának sarokkövei. A HepG2 sejtvonalat először 1975-ben izolálták, és kezdetben tévesen hepatocelluláris karcinómának minősítették, később pedig elismerték, hogy a HepG2 sejtvonal eredetét hepatoblasztómának tekintik, tisztázva az évekig tartó tudományos kétértelműséget.

Az olyan humán májsejtvonalakat, mint a HepG2, általában az elsődleges humán hepatociták in vitro modelljeként használják. Ezek a sejtvonalak olyan előnyöket kínálnak, mint a korlátlan proliferáció, a stabil fenotípus, a könnyű hozzáférhetőség és a könnyű manipulálhatóság. Ugyanakkor a primer hepatocitákhoz képest egyes metabolikus funkciók csökkent expresszióját mutatják. A hepatocelluláris karcinómából származó HepG2 sejtek gyorsan proliferálnak és epithelszerű morfológiával rendelkeznek, számos speciális májfunkciót végeznek. E különbségek ellenére a HepG2 sejteket széles körben használják a gyógyszer-metabolizmus és -toxicitás tanulmányozására, köszönhetően a hepatocelluláris karcinóma- és hepatoblastoma-sejtekhez való hasonlóságuknak a gyógyszer-metabolizmus és a transzportfehérjék tekintetében.

A HepG2 egy humán májrákos sejtvonal, amelyet gyakran használnak a kutatásban, beleértve a gyógyszer-metabolizmus és -toxicitás vizsgálatát is. A hepatoma HepG2 sejtek egyik korlátja azonban az, hogy bizonyos májspecifikus funkciók, köztük a citokróm P450 enzimek expressziójának megváltozott kifejeződése. A citokróm P450 enzimek nélkülözhetetlenek a xenobiotikumok (idegen vegyületek, például gyógyszerek és rákkeltő anyagok) májban történő metabolizmusához. Ezen enzimek megváltozott vagy csökkent expressziója a HepG2 sejtekben befolyásolhatja a xenobiotikumok metabolizmusának és eliminációjának pontos modellezésére való képességüket, ami a májműködés kritikus szempontja.

A HepG2 sejtvonal más hepatoma sejtvonalakkal, például a Hep3B és a humán hepatoma HepaRG sejtvonalakkal együtt hozzájárul a humán májrákos sejtek szélesebb körű megértéséhez. A sejtvonal sokoldalúságával tűnik ki, optimális választásként szolgál stabil sejtvonalak előállításához, transzfekciós vizsgálatokhoz, gyógyszer-metabolizmus és hepatotoxicitási vizsgálatokhoz. Továbbá a HepG2 sejtvonal kulcsfontosságú számos alkalmazásban, a 3D-s sejttenyésztéstől a nagy áteresztőképességű szűrésig és a toxikológiáig.

Szövet
Máj
Betegség
Hepatocelluláris karcinóma
Alkalmazások
Ez a sejtvonal optimális választás a transzfekcióhoz. Továbbá a HepG2 sejtek számos alkalmazási lehetőséget kínálnak a 3D-s sejttenyésztéstől és a rákkutatástól kezdve a nagy áteresztőképességű szűrésig és a toxikológiáig.
Szinonimák
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Daganatképző
Nem
Kariotípus
Modális szám = 55 (tartomány = 50-60), az 1. kromoszóma átrendeződött
Kettőzési idő
48 óra

04Azonosítók

Hivatkozás
HepG2 (Cytion katalógusszám: 300198)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Kifejeződés és fogékonyság

Kifejeződő receptorok
Inzulin, inzulinszerű növekedési faktor II (IGF II)
Fehérjeexpresszió
P53 pozitív
Termékek
Albumin, alfa-fetoprotein (alfa-fetoprotein), alfa1 savas glikoprotein (alfa-1 savas glikoprotein), alfa1 antitripszin (alfa-1-antitripszin), alfa1 antichymotrypsin, (alfa-1-antichymotrypsin), alfa2 HS glikoprotein (alfa-2-HS-glikoprotein), alfa2 makroglobulin (alfa-2-macroglobulin), béta-lipoprotein (béta-lipoprotein), ceruloplazmin, C4 és C3 aktivátor, fibrinogén, haptoglobin, plazminogén, retinolkötő fehérje (retinolkötő fehérje), transzferrin

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
Ham's F12, w: 1,0 mM stabil glutamin, w: 1,0 mM nátrium-piruvát, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion cikkszám 820600a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
2–3 x 104 sejt/cm2 rutin tenyésztés során
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Kezdje el a tenyésztést a kriovial teljes tartalmával 2xT25-ös sejttenyésztő lombikokban. A sejtek 48-72 órán belül regenerálódnak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
15 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi