HepG2-solut

HepG2-solut, hepatoblastoomasolulinja, ovat biologisen tieteen ja erityisesti maksasyövän tutkimuksen kulmakivi. HepG2-solulinja eristettiin ensimmäisen kerran vuonna 1975, ja se luokiteltiin aluksi virheellisesti hepatosellulaariseksi karsinoomaksi. Myöhemmin HepG2-solulinjan alkuperä tunnustettiin hepatoblastoomaksi, mikä selvitti vuosia kestäneen tieteellisen epäselvyyden.

HepG2:n kaltaisia ihmisen maksasolulinjoja käytetään yleisesti in vitro -malleina ihmisen primaarisille hepatosyyteille. Näillä solulinjoilla on etuja, kuten rajoittamaton lisääntyminen, vakaa fenotyyppi, helppo saatavuus ja helppo manipuloitavuus. Niillä on kuitenkin joidenkin aineenvaihduntatoimintojen heikompi ilmentyminen kuin primaarisilla hepatosyyteillä. HepG2-solut ovat peräisin hepatosellulaarisesta karsinoomasta, ja ne lisääntyvät nopeasti ja niillä on epiteelin kaltainen morfologia, ja ne suorittavat monia erikoistuneita maksan toimintoja. Näistä eroista huolimatta HepG2-soluja käytetään laajalti lääkkeiden metabolian ja toksisuuden tutkimiseen, koska ne muistuttavat hepatosellulaarista karsinoomaa ja hepatoblastoomasoluja lääkemetabolian ja kuljetusproteiinien osalta.

HepG2 on ihmisen maksasyöpäsolulinja, jota käytetään usein tutkimuksessa, mukaan lukien lääkkeiden metaboliaa ja toksisuutta koskevat tutkimukset. Yksi hepatooma-HepG2-solujen rajoituksista on kuitenkin se, että ne ilmentävät muuttuneesti tiettyjä maksalle ominaisia toimintoja, kuten sytokromi P450 -entsyymien ilmentymistä. Sytokromi P450 -entsyymit ovat välttämättömiä ksenobioottien (vieraat yhdisteet, kuten lääkkeet ja syöpää aiheuttavat aineet) metaboliassa maksassa. Näiden entsyymien muuttunut tai vähentynyt ilmentyminen HepG2-soluissa voi vaikuttaa niiden kykyyn mallintaa tarkasti ksenobioottien metaboliaa ja eliminaatiota, mikä on kriittinen osa maksan toimintaa.

HepG2-solulinja edistää yhdessä muiden hepatoomasolulinjojen, kuten Hep3B- ja ihmisen hepatooman HepaRG-solulinjojen kanssa ihmisen maksasyöpäsolujen laajempaa ymmärtämistä. Solulinja erottuu monipuolisuudellaan, ja se on optimaalinen valinta vakaiden solulinjojen tuottamiseen, transfektiotutkimuksiin, lääkeaineenvaihduntaan ja hepatotoksisuustutkimuksiin. Lisäksi HepG2-solulinja on keskeinen useissa eri sovelluksissa 3D-soluviljelystä korkean läpimenon seulontaan ja toksikologiaan.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa