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HepG2-Zellen
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom
Synonyme
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

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HepG2-Zellen

Cell line · Artikelnummer 300198

HepG2-Zellen, eine Hepatoblastom-Zelllinie, sind ein Eckpfeiler der Biowissenschaften, insbesondere in der Leberkrebsforschung. Die HepG2-Zelllinie wurde erstmals isoliert...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

HepG2-Zellen, eine Hepatoblastom-Zelllinie, sind ein Eckpfeiler in der biologischen Wissenschaft, insbesondere in der Leberkrebsforschung. Die HepG2-Zelllinie wurde erstmals 1975 isoliert und zunächst fälschlicherweise als hepatozelluläres Karzinom eingestuft. Später wurde die Herkunft der HepG2-Zelllinie als Hepatoblastom anerkannt, wodurch jahrelange wissenschaftliche Unklarheiten beseitigt wurden.

Humane Leberzelllinien wie HepG2 werden häufig als In-vitro-Modelle für primäre menschliche Hepatozyten verwendet. Diese Zelllinien bieten Vorteile wie unbegrenzte Vermehrung, stabiler Phänotyp, leichte Zugänglichkeit und einfache Manipulation. Allerdings weisen sie im Vergleich zu primären Hepatozyten eine geringere Expression einiger Stoffwechselfunktionen auf. HepG2-Zellen, die aus einem hepatozellulären Karzinom stammen, vermehren sich schnell, haben eine epithelähnliche Morphologie und erfüllen viele spezialisierte Leberfunktionen. Trotz dieser Unterschiede werden HepG2-Zellen aufgrund ihrer Ähnlichkeit mit Hepatozellulärkarzinom- und Hepatoblastomzellen in Bezug auf den Arzneimittelstoffwechsel und die Transportproteine häufig zur Untersuchung des Arzneimittelstoffwechsels und der Toxizität verwendet.

HepG2 ist eine menschliche Leberkrebs-Zelllinie, die häufig in der Forschung eingesetzt wird, unter anderem für Studien zum Arzneimittelstoffwechsel und zur Toxizität. Eine der Einschränkungen der HepG2-Zellen ist jedoch ihre veränderte Expression bestimmter leberspezifischer Funktionen, einschließlich der Expression von Cytochrom-P450-Enzymen. Cytochrom-P450-Enzyme sind für den Metabolismus von Xenobiotika (fremde Verbindungen wie Medikamente und Karzinogene) in der Leber unerlässlich. Eine veränderte oder reduzierte Expression dieser Enzyme in HepG2-Zellen kann deren Fähigkeit beeinträchtigen, den Stoffwechsel und die Ausscheidung von Xenobiotika genau zu modellieren, was ein kritischer Aspekt der Leberfunktion ist.

Die HepG2-Zelllinie trägt neben anderen Hepatom-Zelllinien wie der Hep3B- und der humanen Hepatom-Zelllinie HepaRG zu einem umfassenderen Verständnis menschlicher Leberkarzinomzellen bei. Die Zelllinie zeichnet sich durch ihre Vielseitigkeit aus und ist eine optimale Wahl für die Herstellung stabiler Zelllinien, Transfektionsstudien, den Arzneimittelstoffwechsel und Hepatotoxizitätsstudien. Darüber hinaus ist die HepG2-Zelllinie von zentraler Bedeutung für eine Reihe von Anwendungen, von der 3D-Zellkultur bis zum Hochdurchsatz-Screening und zur Toxikologie.

Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom
Anwendungen
Diese Zelllinie ist eine optimale Wahl für die Transfektion. Darüber hinaus bieten die HepG2-Zellen eine Reihe von Anwendungen, die von 3D-Zellkultur und Krebsforschung bis hin zu Hochdurchsatz-Screening und Toxikologie reichen.
Synonyme
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Nein
Karyotyp
Modalzahl = 55 (Bereich = 50 bis 60), hat ein umgeordnetes Chromosom 1
Verdopplungszeit
48 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
HepG2 (Cytion Katalognummer 300198)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Expression und Anfälligkeit

Exprimierte Rezeptoren
Insulin, insulinähnlicher Wachstumsfaktor II (IGF II)
Proteinexpression
P53 positiv
Produkte
Albumin, alpha-Fetoprotein (alpha-Fetoprotein), alpha1 saures Glykoprotein (alpha-1 saures Glykoprotein), alpha1 Antitrypsin (alpha-1-Antitrypsin), alpha1 Antichymotrypsin, (alpha-1-Antichymotrypsin), alpha2 HS-Glykoprotein (alpha-2-HS- Glykoprotein), alpha2-Makroglobulin (alpha-2-Makroglobulin), beta-Lipoprotein (beta-Lipoprotein), Ceruloplasmin, C4- und C3-Aktivator, Fibrinogen, Haptoglobin, Plasminogen, Retinolbindungsprotein (Retinolbindungsprotein), Transferrin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiles Glutamin, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
2 bis 3 x 104 Zellen/cm² während der Routinekultur
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Starten Sie die Kultur mit dem gesamten Inhalt des Kryovials in 2xT25 Zellkulturflaschen. Die Zellen werden sich innerhalb von 48 bis 72 Stunden erholen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
15 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch