Перейти до вмісту
Клітини HepG2
Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Синоніми
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

Документи

Клітини HepG2

Cell line · Номер товару 300198

Клітини HepG2 — клітинна лінія гепатобластоми — є основою біологічних наук, зокрема досліджень раку печінки. Клітинну лінію HepG2 вперше ізо...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітини HepG2, клітинні лінії гепатобластоми, є наріжним каменем у біологічній науці, особливо в дослідженнях раку печінки. Клітинна лінія HepG2 була вперше виділена в 1975 році і спочатку була помилково класифікована як гепатоцелюлярна карцинома, а походження клітинної лінії HepG2 як гепатобластоми було визнано пізніше, що прояснило багаторічну наукову невизначеність.

Клітинні лінії печінки людини, такі як HepG2, широко використовуються як моделі in vitro для отримання первинних гепатоцитів людини. Ці клітинні лінії мають такі переваги, як нескінченна проліферація, стабільний фенотип, легка доступність і простота маніпуляцій. Однак вони демонструють знижену експресію деяких метаболічних функцій порівняно з первинними гепатоцитами. Отримані з гепатоцелюлярної карциноми, клітини HepG2 швидко проліферують і мають епітеліоподібну морфологію, виконуючи багато спеціалізованих печінкових функцій. Незважаючи на ці відмінності, клітини HepG2 широко використовуються для вивчення метаболізму і токсичності лікарських засобів завдяки їх схожості з клітинами гепатоцелюлярної карциноми і гепатобластоми з точки зору метаболізму лікарських засобів і транспортних білків.

HepG2 - це клітинна лінія раку печінки людини, яка часто використовується в дослідженнях, в тому числі в дослідженнях метаболізму і токсичності лікарських засобів. Однак одним з обмежень клітин гепатоми HepG2 є змінена експресія певних печінкових функцій, включаючи експресію ферментів цитохрому Р450. Ферменти цитохрому Р450 необхідні для метаболізму ксенобіотиків (чужорідних сполук, таких як ліки та канцерогени) в печінці. Змінена або знижена експресія цих ферментів у клітинах HepG2 може вплинути на їхню здатність точно моделювати метаболізм і виведення ксенобіотиків, що є критично важливим аспектом функції печінки.

Клітинна лінія HepG2, поряд з іншими лініями клітин гепатоми, такими як Hep3B та HepaRG, сприяє більш глибокому розумінню клітин карциноми печінки людини. Клітинна лінія вирізняється своєю універсальністю, слугуючи оптимальним вибором для отримання стабільних клітинних ліній, досліджень трансфекції, метаболізму лікарських препаратів та гепатотоксичності. Крім того, клітинні лінії HepG2 відіграють ключову роль у широкому спектрі застосувань, від 3D-культури клітин до високопродуктивного скринінгу та токсикології.

Тканина
Печінка
Хвороба
Гепатоцелюлярна карцинома
Застосування
Ця клітинна лінія є оптимальним вибором для трансфекції. Крім того, клітини HepG2 пропонують широкий спектр застосувань, починаючи від 3D-культури клітин і дослідження раку до високопродуктивного скринінгу і токсикології.
Синоніми
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні
Пухлиноутворювальний
Ні
Каріотип
Модальне число = 55 (діапазон = 50-60), має перебудовану хромосому 1
Час подвоєння
48 годин

04Ідентифікатори

Посилання
HepG2 (номер за каталогом Cytion 300198)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0027

05Експресія та сприйнятливість

Рецептори, що експресуються
Інсулін, інсуліноподібний фактор росту II (ІФР II)
Експресія білків
P53 позитивний
Продукція
Альбумін, альфа-фетопротеїн (альфа-фетопротеїн), альфа1 кислий глікопротеїн (альфа-1 кислий глікопротеїн), альфа1 антитрипсин (альфа-1-антитрипсин), альфа1 антихімотрипсин, (альфа-1-антихімотрипсин), альфа2 HS-глікопротеїн (альфа-2-HS- глікопротеїн), альфа2 макроглобулін (альфа-2-макроглобулін), бета-ліпопротеїн (бета-ліпопротеїн), церулоплазмін, активатор С4 і С3, фібриноген, гаптоглобін, плазміноген, ретинолзв'язуючий білок (ретинолзв'язуючий білок), трансферин

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
Ham's F12, w: 1,0 мМ стабільний глютамін, w: 1,0 мМ піруват натрію, w: 1,1 г/л NaHCO3 (Cytion артикул 820600a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
2–3 × 104 клітин/см² під час рутинного культивування
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Почніть культивування, використовуючи весь вміст кріовіалу у 2х колбах для культивування клітин T25. Клітини відновляться протягом 48-72 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Вік донора
15 років
Етнічна приналежність
Кавказець