Gå direkt till innehållet
HepG2-celler
Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Synonymer
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

HepG2-celler

Cell line · Produktnummer 300198

HepG2-celler, en hepatoblastomcellinje, utgör en hörnsten inom biovetenskapen, särskilt inom forskningen om levercancer. HepG2-cellinjen isolerades först...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

HepG2-celler, en hepatoblastomcellinje, är en hörnsten inom biologisk vetenskap, särskilt inom levercancerforskning. HepG2-cellinjen isolerades första gången 1975 och klassificerades initialt felaktigt som hepatocellulärt karcinom, men senare erkändes HepG2-cellinjens ursprung som hepatoblastom, vilket klargjorde åratal av vetenskaplig tvetydighet.

Humana hepatiska cellinjer som HepG2 används ofta som in vitro-modeller för primära humana hepatocyter. Dessa cellinjer erbjuder fördelar som obegränsad proliferation, stabil fenotyp, lättillgänglighet och enkel manipulation. De uppvisar dock ett minskat uttryck av vissa metaboliska funktioner jämfört med primära hepatocyter. HepG2-cellerna, som härrör från hepatocellulärt karcinom, sprider sig snabbt och har en epitelliknande morfologi och utför många specialiserade leverfunktioner. Trots dessa skillnader används HepG2-celler ofta för att studera läkemedelsmetabolism och toxicitet, tack vare sin likhet med hepatocellulära karcinom- och hepatoblastomceller när det gäller läkemedelsmetabolism och transportproteiner.

HepG2 är en human levercancercellinje som ofta används i forskning, bland annat i studier av läkemedelsmetabolism och toxicitet. En av begränsningarna med hepatoma HepG2-celler är dock deras förändrade uttryck av vissa leverspecifika funktioner, inklusive uttryck av cytokrom P450-enzymer. Cytokrom P450-enzymerna är nödvändiga för metabolismen av xenobiotika (främmande föreningar som läkemedel och cancerframkallande ämnen) i levern. Det förändrade eller minskade uttrycket av dessa enzymer i HepG2-celler kan påverka deras förmåga att korrekt modellera metabolismen och elimineringen av xenobiotika, vilket är en kritisk aspekt av leverfunktionen.

HepG2-cellinjen bidrar, tillsammans med andra hepatomcellinjer som Hep3B och HepaRG-cellinjer från humant hepatom, till en bredare förståelse av mänskliga levercancerceller. Cellinjen utmärker sig för sin mångsidighet och är ett optimalt val för generering av stabila cellinjer, transfektionsstudier, läkemedelsmetabolism och hepatotoxicitetsstudier. Dessutom är HepG2-cellinjen central i en rad olika tillämpningar, från 3D-cellodling till screening med hög kapacitet och toxikologi.

Vävnad
Lever
Sjukdom
Hepatocellulärt karcinom
Ansökningar
Denna cellinje är ett optimalt val för transfektion. HepG2-cellerna har dessutom en rad olika användningsområden, allt från 3D-cellodling och cancerforskning till screening med hög kapacitet och toxikologi.
Synonymer
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Tumörframkallande
Nej
Karyotyp
Modalt tal = 55 (intervall = 50 till 60), har en omarrangerad kromosom 1
Fördubblingstid
48 timmar

04Identifierare

Källa
HepG2 (Cytion katalognummer 300198)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Uttryck och mottaglighet

Receptorer som uttrycks
Insulin, insulinliknande tillväxtfaktor II (IGF II)
Proteinexpression
P53-positiv
Produkter
Albumin, alfa-fetoprotein (alfa-fetoprotein), alfa1-syra glykoprotein (alfa-1-syra glykoprotein), alfa1-antitrypsin (alfa-1-antitrypsin), alfa1-ankymotrypsin (alfa-1-ankymotrypsin), alfa2-HS glykoprotein (alfa-2-HS glykoprotein), alfa2-makroglobulin (alfa-2-makroglobulin), beta-lipoprotein (beta-lipoprotein), ceruloplasmin, C4- och C3-aktivator, fibrinogen, haptoglobin, plasminogen, retinolbindande protein (retinolbindande protein), transferrin

06Hantering och odling

Odlingsmedium
Ham's F12, w: 1,0 mM stabilt glutamin, w: 1,0 mM natriumpyruvat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820600a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
2 till 3 x 104 celler/cm2 under rutinodling
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Starta odlingen med hela innehållet i kryovialen i 2xT25 cellodlingsflaskor. Cellerna kommer att återhämta sig inom 48 till 72 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
15 år
Etnicitet
Kaukasisk