HepG2 šūnas

HepG2 šūnas - hepatoblastomas šūnu līnija - ir stūrakmens bioloģijas zinātnē, jo īpaši aknu vēža pētniecībā. HepG2 šūnu līnija pirmo reizi tika izolēta 1975. gadā un sākotnēji kļūdaini klasificēta kā hepatocelulārā karcinoma, bet vēlāk HepG2 šūnu līnijas izcelsme tika atzīta par hepatoblastomu, tādējādi noskaidrojot gadiem ilgušās zinātniskās neskaidrības.

Cilvēka aknu šūnu līnijas, piemēram, HepG2, parasti izmanto kā in vitro modeļus primārajiem cilvēka hepatocītiem. Šīm šūnu līnijām ir tādas priekšrocības kā neierobežota proliferācija, stabils fenotips, viegla pieejamība un viegla manipulācija. Tomēr salīdzinājumā ar primārajiem hepatocītiem tām ir samazināta dažu metabolisko funkciju ekspresija. No hepatocelulārās karcinomas iegūtās HepG2 šūnas ātri vairojas, tām ir epitēlijam līdzīga morfoloģija, un tās veic daudzas specializētas aknu funkcijas. Neraugoties uz šīm atšķirībām, HepG2 šūnas tiek plaši izmantotas zāļu metabolisma un toksicitātes pētījumos, pateicoties to līdzībai ar hepatocelulārās karcinomas un hepatoblastomas šūnām zāļu metabolisma un transporta olbaltumvielu ziņā.

HepG2 ir cilvēka aknu vēža šūnu līnija, ko bieži izmanto pētījumos, tostarp zāļu metabolisma un toksicitātes pētījumos. Tomēr viens no HepG2 hepatomas šūnu ierobežojumiem ir to dažu aknām specifisku funkciju, tostarp citohroma P450 enzīmu, izmainītā ekspresija. Citohroma P450 enzīmi ir būtiski ksenobiotiku (svešķermeņu, piemēram, zāļu un kancerogēnu) metabolismam aknās. Šo enzīmu izmainīta vai samazināta ekspresija HepG2 šūnās var ietekmēt to spēju precīzi modelēt ksenobiotiku metabolismu un izvadīšanu, kas ir būtisks aknu darbības aspekts.

HepG2 šūnu līnija līdzās citām hepatomas šūnu līnijām, piemēram, Hep3B un cilvēka hepatomas HepaRG šūnu līnijām, veicina plašāku izpratni par cilvēka aknu karcinomas šūnām. Šūnu līnija izceļas ar savu daudzpusību, jo tā ir optimāla izvēle stabilu šūnu līniju veidošanai, transfekcijas pētījumiem, zāļu metabolisma un hepatotoksicitātes pētījumiem. Turklāt HepG2 šūnu līnija ir ļoti svarīga virknei lietojumu, sākot no 3D šūnu kultūras līdz augstas veiktspējas skrīningam un toksikoloģijai.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu