Células HepG2

As células HepG2, uma linhagem celular de hepatoblastoma, são um pilar fundamental da ciência biológica, especialmente na pesquisa sobre o câncer de fígado. A linhagem celular HepG2 foi isolada pela primeira vez em 1975 e, inicialmente, classificada erroneamente como carcinoma hepatocelular; só mais tarde se reconheceu que sua origem era o hepatoblastoma, esclarecendo anos de ambiguidade científica.

Linhas celulares hepáticas humanas, como a HepG2, são comumente utilizadas como modelos in vitro para hepatócitos humanos primários. Essas linhas celulares oferecem vantagens como proliferação indefinida, fenótipo estável, fácil acesso e facilidade de manipulação. No entanto, elas apresentam expressão reduzida de algumas funções metabólicas em comparação com os hepatócitos primários. Derivadas do carcinoma hepatocelular, as células HepG2 proliferam rapidamente e apresentam morfologia semelhante à epitelial, desempenhando muitas funções hepáticas especializadas. Apesar dessas diferenças, as células HepG2 são amplamente utilizadas no estudo do metabolismo e da toxicidade de medicamentos, graças à sua semelhança com as células do carcinoma hepatocelular e do hepatoblastoma em termos de metabolismo de medicamentos e proteínas de transporte.

A HepG2 é uma linhagem celular de câncer de fígado humano frequentemente utilizada em pesquisas, incluindo estudos sobre metabolismo e toxicidade de medicamentos. No entanto, uma das limitações das células de hepatoma HepG2 é a expressão alterada de certas funções específicas do fígado, incluindo a expressão das enzimas do citocromo P450. As enzimas do citocromo P450 são essenciais para o metabolismo de xenobióticos (compostos estranhos, como medicamentos e carcinógenos) no fígado. A expressão alterada ou reduzida dessas enzimas nas células HepG2 pode afetar sua capacidade de modelar com precisão o metabolismo e a eliminação de xenobióticos, o que é um aspecto crítico da função hepática.

A linhagem celular HepG2, juntamente com outras linhagens de hepatoma, como as linhagens Hep3B e HepaRG (hepatoma humano), contribui para uma compreensão mais ampla das células do carcinoma hepático humano. A linhagem celular se destaca por sua versatilidade, servindo como uma escolha ideal para a geração de linhagens celulares estáveis, estudos de transfecção, metabolismo de medicamentos e estudos de hepatotoxicidade. Além disso, a linhagem celular HepG2 é fundamental em uma variedade de aplicações, desde a cultura celular 3D até a triagem de alto rendimento e a toxicologia.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.