Komórki HepG2

Komórki HepG2, linia komórkowa hepatoblastoma, są kamieniem węgielnym w naukach biologicznych, szczególnie w badaniach nad rakiem wątroby. Linia komórkowa HepG2 została po raz pierwszy wyizolowana w 1975 roku i początkowo błędnie sklasyfikowana jako rak wątrobowokomórkowy, przy czym pochodzenie linii komórkowej HepG2 jako hepatoblastoma zostało uznane później, wyjaśniając lata naukowych niejasności.

Ludzkie wątrobowe linie komórkowe, takie jak HepG2, są powszechnie stosowane jako modele in vitro dla pierwotnych ludzkich hepatocytów. Te linie komórkowe oferują zalety, takie jak nieokreślona proliferacja, stabilny fenotyp, łatwa dostępność i łatwość manipulacji. Wykazują one jednak zmniejszoną ekspresję niektórych funkcji metabolicznych w porównaniu do pierwotnych hepatocytów. Pochodzące z raka wątrobowokomórkowego komórki HepG2 szybko się namnażają i mają morfologię podobną do nabłonka, pełniąc wiele wyspecjalizowanych funkcji wątrobowych. Pomimo tych różnic, komórki HepG2 są szeroko stosowane w badaniach metabolizmu i toksyczności leków, dzięki ich podobieństwu do komórek raka wątrobowokomórkowego i hepatoblastoma pod względem metabolizmu leków i białek transportowych.

HepG2 to ludzka linia komórek raka wątroby często wykorzystywana w badaniach, w tym w badaniach nad metabolizmem i toksycznością leków. Jednak jednym z ograniczeń komórek HepG2 jest ich zmieniona ekspresja niektórych funkcji specyficznych dla wątroby, w tym ekspresja enzymów cytochromu P450. Enzymy cytochromu P450 są niezbędne do metabolizmu ksenobiotyków (obcych związków, takich jak leki i substancje rakotwórcze) w wątrobie. Zmieniona lub zmniejszona ekspresja tych enzymów w komórkach HepG2 może wpływać na ich zdolność do dokładnego modelowania metabolizmu i eliminacji ksenobiotyków, co jest krytycznym aspektem funkcjonowania wątroby.

Linia komórkowa HepG2, wraz z innymi liniami komórkowymi hepatoma, takimi jak Hep3B i ludzkimi liniami komórkowymi hepatoma HepaRG, przyczynia się do szerszego zrozumienia ludzkich komórek raka wątroby. Linia komórkowa wyróżnia się wszechstronnością, służąc jako optymalny wybór do generowania stabilnych linii komórkowych, badań transfekcji, metabolizmu leków i badań hepatotoksyczności. Co więcej, linia komórkowa HepG2 ma kluczowe znaczenie w szeregu zastosowań, od hodowli komórek 3D po wysokoprzepustowe badania przesiewowe i toksykologię.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym