Mine otse sisu juurde
HepG2 rakud
Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Sünonüümid
HEP-G2, Hep G2, HEP G2, Hep-G2, HEPG2

Dokumendid

HepG2 rakud

Cell line · Toote number 300198

HepG2-rakud, hepatoblastoomi rakuliin, on bioloogiliste teaduste nurgakivi, eriti maksavähi uurimisel. HepG2-rakuliin isoleeriti esmakordselt...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HepG2 rakud, hepatoblastoomi rakuliin, on bioloogilise teaduse, eriti maksavähi uurimise nurgakivi. HepG2 rakuliin isoleeriti esmakordselt 1975. aastal ja esialgu klassifitseeriti see valesti hepatotsellulaarseks kartsinoomiks, hiljem tunnistati HepG2 rakuliini päritolu hepatoblastoomiks, mis selgitas aastaid kestnud teaduslikku ebaselgust.

Inimese maksa rakuliine, nagu HepG2, kasutatakse tavaliselt in vitro mudelina inimese primaarsete hepatotsüütide jaoks. Nende rakuliinide eelised on piiramatu proliferatsioon, stabiilne fenotüüp, lihtne ligipääsetavus ja manipuleeritavus. Siiski on neil võrreldes primaarsete hepatotsüütidega vähenenud mõnede ainevahetuse funktsioonide ekspressioon. HepG2 rakud, mis on saadud hepatotsellulaarsest kartsinoomist, paljunevad kiiresti ja on epiteelilaadse morfoloogiaga, täites mitmeid spetsialiseeritud maksafunktsioone. Vaatamata nendele erinevustele kasutatakse HepG2 rakke laialdaselt ravimite metabolismi ja toksilisuse uurimisel, tänu nende sarnasusele hepatotsellulaarse kartsinoomi ja hepatoblastoomi rakkudega ravimite metabolismi ja transpordivalkude osas.

HepG2 on inimese maksavähi rakuliin, mida kasutatakse sageli teadusuuringutes, sealhulgas ravimite metabolismi ja toksilisuse uuringutes. Üks hepatoomi HepG2 rakkude piiranguid on siiski nende teatavate maksaspetsiifiliste funktsioonide, sealhulgas tsütokroom P450 ensüümide ekspressiooni muutunud ekspressioon. Tsütokroom P450 ensüümid on olulised ksenobiootikumide (võõraste ühendite, nagu ravimid ja kantserogeenid) metabolismis maksas. Nende ensüümide muutunud või vähenenud ekspressioon HepG2 rakkudes võib mõjutada nende võimet modelleerida täpselt ksenobiootikumide metabolismi ja eliminatsiooni, mis on maksafunktsiooni kriitiline aspekt.

HepG2 rakuliin aitab koos teiste hepatoomi rakuliinidega, nagu Hep3B ja inimese hepatoomi HepaRG rakuliinid, kaasa inimese maksakartsinoomi rakkude laiemale tundmaõppimisele. Rakuliin paistab silma oma mitmekülgsuse poolest, olles optimaalne valik stabiilse rakuliini loomiseks, transfektsiooniuuringuteks, ravimite metabolismi ja hepatotoksilisuse uuringuteks. Lisaks sellele on HepG2 rakuliin keskse tähtsusega mitmetes rakendustes, alates 3D rakukultuurist kuni suure läbilaskevõimega sõeluuringute ja toksikoloogiani.

Kude
Maksa
Haigus
Hepatotsellulaarne kartsinoom
Rakendused
See rakuliin on optimaalne valik transfektsiooniks. Lisaks pakuvad HepG2 rakud mitmesuguseid rakendusi, alates 3D-rakukultuuridest ja vähiuuringutest kuni suure läbilaskevõimega sõeluuringute ja toksikoloogiani.
Sünonüümid
  • HEP-G2
  • Hep G2
  • HEP G2
  • Hep-G2
  • HEPG2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Ei
Karyotüüp
Modaalarv = 55 (vahemik = 50 kuni 60), on ümber paigutatud kromosoom 1
Kahekordistumisaeg
48 tundi

04Tunnused

Viide
HepG2 (Cytioni katalooginumber 300198)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_0027

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Ekspresseeritud retseptorid
Insuliin, insuliinilaadne kasvufaktor II (IGF II)
Valgu ekspressioon
P53 positiivne
Tooted
Albumiin, alfa-fetoproteiin (alfa-fetoproteiin), alfa1-happe glükoproteiin (alfa-1-happe glükoproteiin), alfa1-antitrüpsiin (alfa-1-antitrüpsiin), alfa1-antitümotrüpsiin (alfa-1-antitümotrüpsiin), alfa2-HS-glükoproteiin (alfa-2-HS-glükoproteiin), alfa2-makroglobuliin (alfa-2-makroglobuliin), beetalipoproteiin (beetalipoproteiin), tseruloplasmiin, C4- ja C3-aktivaator, fibrinogeen, haptoglobiin, plasminogeen, retinooli siduv valk (retinooli siduv valk), transferriin

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
Ham's F12, w: 1,0 mM stabiilne glutamiin, w: 1,0 mM naatriumpüruvaat, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820600a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Külvitihedus
2 kuni 3 x 104 rakku/cm2 tavapärase kultuuri ajal
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Taastumine pärast sulamist
Alustage kasvatamist, kasutades kogu krüoviaalide sisu 2xT25 rakukultuurikolbides. Rakud taastuvad 48-72 tunni jooksul.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
15 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia