HepG2-celler

HepG2-celler, en hepatoblastom-cellelinje, er en hjørnesten i den biologiske videnskab, især inden for forskning i leverkræft. HepG2-cellelinjen blev første gang isoleret i 1975 og oprindeligt fejlklassificeret som hepatocellulært karcinom, men senere blev HepG2-cellelinjens oprindelse anerkendt som hepatoblastom, hvilket afklarede mange års videnskabelig tvetydighed.

Humane levercellelinjer som HepG2 bruges ofte som in vitro-modeller for primære humane hepatocytter. Disse cellelinjer giver fordele som ubegrænset spredning, stabil fænotype, let tilgængelighed og nem manipulation. De udviser dog et reduceret udtryk for nogle metaboliske funktioner sammenlignet med primære hepatocytter. HepG2-celler, der stammer fra hepatocellulært karcinom, spreder sig hurtigt og har en epitellignende morfologi og udfører mange specialiserede leverfunktioner. På trods af disse forskelle bruges HepG2-celler i vid udstrækning til at studere lægemiddelmetabolisme og -toksicitet takket være deres lighed med hepatocellulære karcinom- og hepatoblastomceller med hensyn til lægemiddelmetabolisme og transportproteiner.

HepG2 er en human leverkræftcellelinje, der ofte bruges i forskning, herunder undersøgelser af lægemiddelmetabolisme og -toksicitet. Men en af begrænsningerne ved hepatom HepG2-celler er deres ændrede udtryk for visse leverspecifikke funktioner, herunder udtrykket af cytokrom P450-enzymer. Cytokrom P450-enzymer er afgørende for metabolismen af xenobiotika (fremmede forbindelser som lægemidler og kræftfremkaldende stoffer) i leveren. Ændret eller reduceret udtryk af disse enzymer i HepG2-celler kan påvirke deres evne til nøjagtigt at modellere metabolismen og elimineringen af xenobiotika, hvilket er et kritisk aspekt af leverfunktionen.

HepG2-cellelinjen bidrager sammen med andre hepatomcellelinjer som Hep3B og HepaRG-cellelinjen til en bredere forståelse af humane leverkarcinomceller. Cellelinjen udmærker sig ved sin alsidighed og er et optimalt valg til generering af stabile cellelinjer, transfektionsstudier, lægemiddelmetabolisme og hepatotoksicitetsstudier. Desuden er HepG2-cellelinjen central i en række anvendelser, fra 3D-cellekultur til high-throughput-screening og toksikologi.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring