Cellule HepG2

Le cellule HepG2, una linea cellulare di epatoblastoma, sono una pietra miliare nella scienza biologica, in particolare nella ricerca sul cancro del fegato. La linea cellulare HepG2 è stata isolata per la prima volta nel 1975 e inizialmente classificata erroneamente come carcinoma epatocellulare; successivamente è stata riconosciuta l'origine della linea cellulare HepG2 come epatoblastoma, chiarendo anni di ambiguità scientifica.

Le linee cellulari epatiche umane come l'HepG2 sono comunemente utilizzate come modelli in vitro per gli epatociti umani primari. Queste linee cellulari offrono vantaggi quali la proliferazione indefinita, il fenotipo stabile, la facile accessibilità e la facilità di manipolazione. Tuttavia, presentano una ridotta espressione di alcune funzioni metaboliche rispetto agli epatociti primari. Derivate dal carcinoma epatocellulare, le cellule HepG2 proliferano rapidamente e hanno una morfologia simile a quella epiteliale, svolgendo molte funzioni epatiche specializzate. Nonostante queste differenze, le cellule HepG2 sono ampiamente utilizzate nello studio del metabolismo e della tossicità dei farmaci, grazie alla loro somiglianza con le cellule di carcinoma epatocellulare e di epatoblastoma in termini di metabolismo dei farmaci e proteine di trasporto.

L'HepG2 è una linea cellulare di cancro al fegato umano spesso utilizzata nella ricerca, compresi gli studi sul metabolismo e la tossicità dei farmaci. Tuttavia, una delle limitazioni delle cellule di epatoma HepG2 è la loro alterata espressione di alcune funzioni specifiche del fegato, tra cui l'espressione degli enzimi del citocromo P450. Gli enzimi del citocromo P450 sono essenziali per il metabolismo degli xenobiotici (composti estranei come farmaci e agenti cancerogeni) nel fegato. L'espressione alterata o ridotta di questi enzimi nelle cellule HepG2 può influire sulla loro capacità di modellare accuratamente il metabolismo e l'eliminazione degli xenobiotici, che è un aspetto critico della funzione epatica.

La linea cellulare HepG2, insieme ad altre linee cellulari di epatoma come la Hep3B e le linee cellulari di epatoma umano HepaRG, contribuisce a una più ampia comprensione delle cellule di carcinoma epatico umano. La linea cellulare si distingue per la sua versatilità, rappresentando una scelta ottimale per la generazione di linee cellulari stabili, studi di trasfezione, metabolismo dei farmaci e studi di epatotossicità. Inoltre, la linea cellulare HepG2 è fondamentale in una serie di applicazioni, dalla coltura cellulare 3D allo screening high-throughput e alla tossicologia.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia