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K562-GFP
Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Leucémie myéloïde chronique

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K562-GFP

Cell line · Référence du produit 305948

Les cellules K-562-GFP constituent une variante génétiquement modifiée de la lignée cellulaire K-562 issue de la leucémie myéloïde chronique (LMC) humaine, dérivée à l'origine du sang périphérique...

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

Les cellules K-562-GFP constituent une variante génétiquement modifiée de la lignée cellulaire K-562 issue de la leucémie myéloïde chronique (LMC) humaine, dérivée à l'origine du sang périphérique d'un patient adulte en crise blastique. La lignée parentale K-562 se caractérise par la présence du chromosome Philadelphie, qui donne lieu à la protéine de fusion BCR-ABL dotée d’une activité tyrosine kinase constitutive, responsable d’une prolifération et d’une survie incontrôlées. Les cellules K-562 présentent des caractéristiques d’érythroleucémie et peuvent être amenées à se différencier selon les lignées érythroïde, mégacaryocytaire ou monocytaire dans des conditions expérimentales spécifiques, ce qui en fait un modèle polyvalent pour l’étude de la différenciation hématopoïétique et de la biologie de la leucémie.

L’introduction de la protéine fluorescente verte (GFP) dans les cellules K-562 permet la visualisation et le suivi en temps réel du comportement des cellules leucémiques in vitro et in vivo. Les cellules K-562-GFP sont largement utilisées dans les tests portant sur la prolifération cellulaire, la migration et la réponse aux médicaments, ainsi que dans des systèmes de co-culture pour étudier les interactions avec les cellules stromales ou immunitaires. Le marquage fluorescent facilite des applications telles que la cytométrie en flux, l’imagerie de cellules vivantes et le criblage à haut débit.

Modification génétique : modification stable obtenue par transduction lentivirale à réplication incompétente pour exprimer le rapporteur protéique fluorescent vert ZsGreen1 ; maintenue sous forme de population polyclonale sous sélection à la puromycine (1 à 5 µg/mL). Niveau de confinement S1/BSL-1.

Tissu
Épanchement pleural
Maladie
Leucémie myéloïde chronique

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Suspension
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type lymphoblaste
Type de cellule
Lymphoblaste

04Identifiants

Référence
K562-GFP (référence Cytion 305948)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Expression et sensibilité

Expression des antigènes
ZsGreen1 (protéine fluorescente verte)
Profil mutationnel
Mutation : p.Gln136fs*13, homozygote

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Aucun
Repiquage
Entretenez les cultures en ajoutant ou en remplaçant périodiquement le milieu. Démarrez les cultures avec une densité de 5 x 105 cellules/ml et maintenez la concentration cellulaire dans une fourchette comprise entre 3 x 105 et 1 x 106 cellules/ml pour une croissance optimale.
Densité de semis
0,3 à 1 × 10⁶ cellules/ml
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Contrôle qualité et cryoconservation

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
53 ans
Origine ethnique
Caucasien