K562-GFP

As células K-562-GFP são uma variante geneticamente modificada da linha celular K-562 da leucemia mielóide crónica (LMC) humana, originalmente derivada do sangue periférico de um doente adulto em crise blástica. A linha parental K-562 caracteriza-se pela presença do cromossoma Filadélfia, o que resulta na proteína de fusão BCR-ABL com atividade constitutiva da tirosina quinase, responsável pela proliferação e sobrevivência descontroladas. As células K-562 apresentam características de eritroleucemia e podem ser induzidas a diferenciar-se ao longo das linhagens eritróide, megacariocítica ou monocítica em condições experimentais específicas, tornando-as um modelo versátil para o estudo da diferenciação hematopoiética e da biologia da leucemia.

A introdução da proteína fluorescente verde (GFP) nas células K-562 permite a visualização e o acompanhamento em tempo real do comportamento das células leucémicas in vitro e in vivo. As células K-562-GFP são amplamente utilizadas em ensaios que envolvem proliferação celular, migração e resposta a fármacos, bem como em sistemas de cocultura para estudar interações com células estromais ou imunitárias. A marcação fluorescente facilita aplicações como a citometria de fluxo, a imagiologia de células vivas e o rastreio de alto rendimento.

Modificação genética: Modificadas de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, de modo a expressarem o repórter da proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantidas como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia