Mine otse sisu juurde
K562-GFP
Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia

Dokumendid

K562-GFP

Cell line · Toote number 305948

K-562-GFP rakud on inimese kroonilise müelogeense leukeemia (CML) rakuliini K-562 geneetiliselt muundatud variant, mis on algselt saadud perifeersest...

€800.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

K-562-GFP rakud on inimese kroonilise müelooosse leukeemia (CML) rakuliini K-562 geneetiliselt muundatud variant, mis on algselt saadud blastkriisis oleva täiskasvanud patsiendi perifeersest verest. Ema-rakuliini K-562 iseloomustab Philadelphia kromosoomi olemasolu, mille tulemusena tekib BCR-ABL-fusioonvalk, millel on konstitutiivne türosiinkinaasi aktiivsus, mis soodustab kontrollimatut proliferatsiooni ja ellujäämist. K-562 rakud näitavad erütroleukemia tunnuseid ning neid on võimalik spetsiifilistes katsetingimustes indutseerida diferentseeruma erütroid-, megakariootsüüt- või monotsüütide liinidesse, mis teeb neist mitmekülgse mudeli vereloome diferentseerumise ja leukeemia bioloogia uurimiseks.

Rohelise fluorestsentsvalgu (GFP) sisseviimine K-562 rakkudesse võimaldab leukeemiliste rakkude käitumise reaalajas visualiseerimist ja jälgimist nii in vitro kui ka in vivo. K-562-GFP-rakke kasutatakse laialdaselt rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja ravimireaktsiooni uuringutes, samuti ko-kultuuri süsteemides, et uurida interaktsioone strooma- või immuunrakkudega. Fluorestsentsmärgistus hõlbustab selliseid rakendusi nagu voolutsütomeetria, elusrakkude pildistamine ja suure läbilaskevõimega sõelumine.

Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; säilitatakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.

Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Krooniline müeloidne leukeemia

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Vedrustus
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Lümfoblastilaadsed
Rakutüüp
Lümfoblastid

04Tunnused

Viide
K562-GFP (Cytioni katalooginumber 305948)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
ZsGreen1 (roheline fluorestsentsvalk)
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: p.Gln136fs*13, homosügootne

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Puudub
Kultuuri edasikasvatamine
Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
Külvitihedus
0,3–1 × 10⁶ rakku/ml
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
53 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia