K562-GFP
Cell line · Toote number 305948
K-562-GFP rakud on inimese kroonilise müelogeense leukeemia (CML) rakuliini K-562 geneetiliselt muundatud variant, mis on algselt saadud perifeersest...
Kohandamine / Soovitused
- K562-GFPCell line€800.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
K-562-GFP rakud on inimese kroonilise müelooosse leukeemia (CML) rakuliini K-562 geneetiliselt muundatud variant, mis on algselt saadud blastkriisis oleva täiskasvanud patsiendi perifeersest verest. Ema-rakuliini K-562 iseloomustab Philadelphia kromosoomi olemasolu, mille tulemusena tekib BCR-ABL-fusioonvalk, millel on konstitutiivne türosiinkinaasi aktiivsus, mis soodustab kontrollimatut proliferatsiooni ja ellujäämist. K-562 rakud näitavad erütroleukemia tunnuseid ning neid on võimalik spetsiifilistes katsetingimustes indutseerida diferentseeruma erütroid-, megakariootsüüt- või monotsüütide liinidesse, mis teeb neist mitmekülgse mudeli vereloome diferentseerumise ja leukeemia bioloogia uurimiseks.
Rohelise fluorestsentsvalgu (GFP) sisseviimine K-562 rakkudesse võimaldab leukeemiliste rakkude käitumise reaalajas visualiseerimist ja jälgimist nii in vitro kui ka in vivo. K-562-GFP-rakke kasutatakse laialdaselt rakkude proliferatsiooni, migratsiooni ja ravimireaktsiooni uuringutes, samuti ko-kultuuri süsteemides, et uurida interaktsioone strooma- või immuunrakkudega. Fluorestsentsmärgistus hõlbustab selliseid rakendusi nagu voolutsütomeetria, elusrakkude pildistamine ja suure läbilaskevõimega sõelumine.
Geneetiline modifikatsioon: stabiilselt modifitseeritud replikatsioonivõimetu lentiviiruse transduktsiooni abil, et ekspresseerida rohelist fluorestsentsvalku ZsGreen1; säilitatakse polükloonilise populatsioonina puromütsiini selektsiooni all (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 ohutustase.
- Kude
- Pleuraefusioon
- Haigus
- Krooniline müeloidne leukeemia
02Klassifikatsioon
- Organism
- Inimene
- Sugu
- Naine
- Kasvuvõime
- Vedrustus
- GMO-staatus
- GMO-S1
- GMO-staatuse üksikasjad
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Lümfoblastilaadsed
- Rakutüüp
- Lümfoblastid
04Tunnused
- Viide
- K562-GFP (Cytioni katalooginumber 305948)
- NCBI maksukood
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1G55
05Avaldumine ja vastuvõtlikkus
- Antigeeni ekspressioon
- ZsGreen1 (roheline fluorestsentsvalk)
- Mutatsiooniprofiil
- Mutatsioon: p.Gln136fs*13, homosügootne
06Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS-ga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Puudub
- Kultuuri edasikasvatamine
- Säilitage kultuure, lisades või asendades perioodiliselt kasvukeskkonda. Alustage kultuuride kasvatamist tihedusega 5 x 105 rakku/ml ja hoidke rakkude kontsentratsioon vahemikus 3 x 105 kuni 1 x 106 rakku/ml optimaalse kasvu tagamiseks.
- Külvitihedus
- 0,3–1 × 10⁶ rakku/ml
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
08Annetaja
- Doonori vanus
- 53 aastat
- Etniline kuuluvus
- Kaukaasia
09Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
