Prejsť na obsah
K562-GFP
Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Chronická myeloidná leukémia

Dokumenty

K562-GFP

Cell line · Číslo výrobku 305948

Bunky K-562-GFP sú geneticky modifikovanou variantou buneckej línie K-562 pochádzajúcej z ľudskej chronickej myeloidnej leukémie (CML), ktorá bola pôvodne izolovaná z periférnej...

€800.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky K-562-GFP sú geneticky modifikovanou variantou buneckej línie K-562 pochádzajúcej z ľudskej chronickej myeloidnej leukémie (CML), ktorá bola pôvodne izolovaná z periférnej krvi dospelého pacienta v blastovej kríze. Rodičovská línia K-562 sa vyznačuje prítomnosťou Filadelfského chromozómu, čo vedie k tvorbe fúzného proteínu BCR-ABL s konštitutívnou tyrozínkinázovou aktivitou, ktorá riadi nekontrolovanú proliferáciu a prežívanie buniek. Bunky K-562 vykazujú znaky erytroleukémie a za špecifických experimentálnych podmienok je možné ich indukovať k diferenciácii v erytroidnej, megakaryocytovej alebo monocytovej línii, čo z nich robí univerzálny model na štúdium hematopoetickej diferenciácie a biológie leukémie.

Zavedenie zeleného fluorescenčného proteínu (GFP) do buniek K-562 umožňuje vizualizáciu a sledovanie správania leukemických buniek v reálnom čase in vitro aj in vivo. Bunky K-562-GFP sa široko využívajú v testoch zameraných na bunkovú proliferáciu, migráciu a reakciu na lieky, ako aj v systémoch spoločnej kultivácie na štúdium interakcií so stromálnymi alebo imunitnými bunkami. Fluorescenčné značenie uľahčuje aplikácie, ako sú prietoková cytometria, zobrazovanie živých buniek a vysokokapacitné skríningové testy.

Genetická modifikácia: Stabilne modifikované replikačne nekompetentnou lentivírusovou transdukciou na expresiu reportéra zeleného fluorescenčného proteínu ZsGreen1; udržiavané ako polyklonálna populácia pod selekciou puromycínom (1–5 µg/mL). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

Tkanivo
Pleurálny výpotok
Choroba
Chronická myeloidná leukémia

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Zavesenie
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Lymfoblastom podobné
Typ bunky
Lymfoblast

04Identifikátory

Citácia
K562-GFP (katalógové číslo Cytion 305948)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Prejav a náchylnosť

Expresia antigénu
ZsGreen1 (zelený fluorescenčný proteín)
Mutčný profil
Mutácia: p.Gln136fs*13, homozygotná

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilný glutamín, w: 2,0 g/L NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Žiadne
Rozmnožovanie kultúr
Kultúry udržiavajte pravidelným pridávaním alebo výmenou média. Kultúry začnite s hustotou 5 x 105 buniek/ml a pre optimálny rast udržujte koncentráciu buniek v rozmedzí 3 x 105 až 1 x 106 buniek/ml.
Hustota výsevu
0,3 až 1 × 10⁶ buniek/ml
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Mrazové médium
Ako médium na kryokonzerváciu používame kompletné rastové médium + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
53 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský