Tartalomra ugrás
K562-GFP
Szövet
Mellhártya folyadékgyülem
Betegség
Krónikus myeloid leukémia

Dokumentumok

K562-GFP

Cell line · Termékszám 305948

A K-562-GFP sejtek az emberi krónikus mieloid leukémia (CML) K-562 sejtvonalának genetikailag módosított változatai, amelyeket eredetileg a perifériás…

€800.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

A K-562-GFP sejtek az emberi krónikus mieloid leukémia (CML) K-562 sejtvonalának genetikailag módosított változatai, amelyeket eredetileg egy blasztkrízisben lévő felnőtt beteg perifériás véréből nyertek ki. Az eredeti K-562 vonalat a Philadelphia-kromoszóma jelenléte jellemzi, amely a konstitutív tirozin-kináz aktivitással rendelkező BCR-ABL fúziós fehérjét eredményezi, ami ellenőrizhetetlen szaporodást és túlélést vált ki. A K-562 sejtek eritroleukémiás jellemzőket mutatnak, és meghatározott kísérleti körülmények között eritroid, megakariocita vagy monocita vonalak mentén történő differenciálódásra indukálhatók, ami sokoldalú modellé teszi őket a hematopoietikus differenciálódás és a leukémia biológiájának tanulmányozásához.

A zöld fluoreszcens fehérje (GFP) bejuttatása a K-562 sejtekbe lehetővé teszi a leukémiás sejtek viselkedésének valós idejű vizualizálását és nyomon követését in vitro és in vivo körülmények között. A K-562-GFP sejteket széles körben használják a sejtproliferációval, migrációval és gyógyszerreakcióval kapcsolatos vizsgálatokban, valamint ko-kultúra rendszerekben a stromális vagy immunsejtekkel való kölcsönhatások tanulmányozására. A fluoreszcens jelölés megkönnyíti olyan alkalmazások használatát, mint az áramlási citometria, az élő sejtek képalkotása és a nagy áteresztőképességű szűrés.

Genetikai módosítás: Replikációra képtelen lentivirális transzdukcióval stabilan módosítva a ZsGreen1 zöld fluoreszcens fehérje riporter expressziójára; puromicin szelekció (1–5 µg/mL) alatt poliklonális populációként fenntartva. S1/BSL-1 biztonsági szint.

Szövet
Mellhártya folyadékgyülem
Betegség
Krónikus myeloid leukémia

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Felfüggesztés
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Limfoblaszt-szerű
Sejttípus
Limfoblasztok

04Azonosítók

Hivatkozás
K562-GFP (Cytion katalógusszám: 305948)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Kifejeződés és fogékonyság

Antigén-expresszió
ZsGreen1 (zöld fluoreszkáló fehérje)
Mutációs profil
Mutáció: p.Gln136fs*13, homozigóta

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Nincs
Átültetés
A tenyészeteket a táptalaj rendszeres hozzáadásával vagy cseréjével tartsa fenn. A tenyészeteket 5 x 105 sejt/ml sűrűséggel indítsa el, és az optimális növekedés érdekében tartsa a sejtkoncentrációt 3 x 105 és 1 x 106 sejt/ml közötti tartományban.
Ültetési sűrűség
0,3–1 × 10⁶ sejt/ml
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
53 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi