K562-GFP
Cell line · Preces numurs 305948
K-562-GFP šūnas ir ģenētiski modificēts cilvēka hroniskās mielogēnās leikēmijas (CML) šūnu līnijas K-562 variants, kas sākotnēji iegūts no perifērajām...
Pielāgošana / Ieteikumi
- K562-GFPCell line€800.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
K-562-GFP šūnas ir ģenētiski modificēts cilvēka hroniskās mielogēnās leikēmijas (CML) šūnu līnijas K-562 variants, kas sākotnēji iegūts no pieauguša pacienta perifērās asinis, kurš atradās blastu krīzes stadijā. Mātes K-562 līnija raksturojas ar Filadelfijas hromosomas klātbūtni, kā rezultātā rodas BCR-ABL fūzijas proteīns ar konstitutīvu tirozīna kināzes aktivitāti, kas veicina nekontrolētu proliferāciju un izdzīvošanu. K-562 šūnas uzrāda eritroleikēmijas pazīmes, un noteiktos eksperimentālos apstākļos tās var inducēt diferencēties pa eritroīdo, megakariocīto vai monocīto līniju, tādējādi padarot tās par daudzpusīgu modeli hematopoētiskās diferenciācijas un leikēmijas bioloģijas pētīšanai.
Zaļās fluorescences proteīna (GFP) ievadīšana K-562 šūnās ļauj reāllaikā vizualizēt un izsekot leikēmijas šūnu uzvedībai in vitro un in vivo. K-562-GFP šūnas plaši izmanto testos, kas saistīti ar šūnu proliferāciju, migrāciju un reakciju uz zālēm, kā arī kopkultūras sistēmās, lai pētītu mijiedarbību ar stromas vai imūnsistēmas šūnām. Fluorescences marķējums atvieglo tādu metožu izmantošanu kā plūsmas citometrija, dzīvo šūnu attēlveidošana un augstas caurlaidspējas skrīnings.
Ģenētiskā modifikācija: stabili modificētas ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļo fluorescējošo proteīnu reporteru; tiek uzturētas kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.
- Audums
- Pleiras izsvīdums
- Slimība
- Hroniska mieloīdo leikēmija
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Sieviete
- Augšanas īpašības
- Atsperes
- ĢMO statuss
- GMO-S1
- Sīkāka informācija par ĢMO statusu
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Limfoblastiem līdzīgs
- Šūnu tips
- Limfoblasts
04Identifikatori
- Atsauce
- K562-GFP (Cytion kataloga numurs 305948)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1G55
05Pazīmes un uzņēmība
- Antigēna ekspresija
- ZsGreen1 (zaļais fluorescējošais proteīns)
- Mutāciju profils
- Mutācija: p.Gln136fs*13, homozigota
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Neviens
- Pārstādīšana
- Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
- Sēšanas blīvums
- 0,3 līdz 1 x 10⁶ šūnu/ml
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 53 gadi
- Etniskā piederība
- Kaukāzietis
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā
