Pāriet uz saturu
K562-GFP
Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Hroniska mieloīdo leikēmija

Dokumenti

K562-GFP

Cell line · Preces numurs 305948

K-562-GFP šūnas ir ģenētiski modificēts cilvēka hroniskās mielogēnās leikēmijas (CML) šūnu līnijas K-562 variants, kas sākotnēji iegūts no perifērajām...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

K-562-GFP šūnas ir ģenētiski modificēts cilvēka hroniskās mielogēnās leikēmijas (CML) šūnu līnijas K-562 variants, kas sākotnēji iegūts no pieauguša pacienta perifērās asinis, kurš atradās blastu krīzes stadijā. Mātes K-562 līnija raksturojas ar Filadelfijas hromosomas klātbūtni, kā rezultātā rodas BCR-ABL fūzijas proteīns ar konstitutīvu tirozīna kināzes aktivitāti, kas veicina nekontrolētu proliferāciju un izdzīvošanu. K-562 šūnas uzrāda eritroleikēmijas pazīmes, un noteiktos eksperimentālos apstākļos tās var inducēt diferencēties pa eritroīdo, megakariocīto vai monocīto līniju, tādējādi padarot tās par daudzpusīgu modeli hematopoētiskās diferenciācijas un leikēmijas bioloģijas pētīšanai.

Zaļās fluorescences proteīna (GFP) ievadīšana K-562 šūnās ļauj reāllaikā vizualizēt un izsekot leikēmijas šūnu uzvedībai in vitro un in vivo. K-562-GFP šūnas plaši izmanto testos, kas saistīti ar šūnu proliferāciju, migrāciju un reakciju uz zālēm, kā arī kopkultūras sistēmās, lai pētītu mijiedarbību ar stromas vai imūnsistēmas šūnām. Fluorescences marķējums atvieglo tādu metožu izmantošanu kā plūsmas citometrija, dzīvo šūnu attēlveidošana un augstas caurlaidspējas skrīnings.

Ģenētiskā modifikācija: stabili modificētas ar replikācijas nespējīgu lentivīrusa transdukciju, lai ekspresētu ZsGreen1 zaļo fluorescējošo proteīnu reporteru; tiek uzturētas kā poliklonāla populācija puromicīna selekcijas apstākļos (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 drošības līmenis.

Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Hroniska mieloīdo leikēmija

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atsperes
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblastiem līdzīgs
Šūnu tips
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
K562-GFP (Cytion kataloga numurs 305948)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
ZsGreen1 (zaļais fluorescējošais proteīns)
Mutāciju profils
Mutācija: p.Gln136fs*13, homozigota

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Neviens
Pārstādīšana
Kultūras uzturiet, periodiski pievienojot vai nomainot barotni. Kultūras uzsāciet ar blīvumu 5 x 105 šūnas/ml un uzturiet šūnu koncentrāciju diapazonā no 3 x 105 līdz 1 x 106 šūnas/ml, lai nodrošinātu optimālu augšanu.
Sēšanas blīvums
0,3 līdz 1 x 10⁶ šūnu/ml
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
53 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis