Ga naar de inhoud
K562-GFP
Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Chronische myeloïde leukemie

Documenten

K562-GFP

Cell line · Productnummer 305948

K-562-GFP-cellen zijn een genetisch gemodificeerde variant van de menselijke chronische myeloïde leukemie (CML)-cellijn K-562, die oorspronkelijk afkomstig is uit het perifere...

€800.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

K-562-GFP-cellen zijn een genetisch gemodificeerde variant van de menselijke chronische myeloïde leukemie (CML)-cellijn K-562, die oorspronkelijk is afgeleid van het perifere bloed van een volwassen patiënt in de blastcrisis. De oorspronkelijke K-562-lijn wordt gekenmerkt door de aanwezigheid van het Philadelphia-chromosoom, wat resulteert in het BCR-ABL-fusie-eiwit met constitutieve tyrosinekinase-activiteit, dat ongecontroleerde proliferatie en overleving stimuleert. K-562-cellen vertonen kenmerken van erytroleukemie en kunnen onder specifieke experimentele omstandigheden worden gestimuleerd om differentiatie te ondergaan langs erytroïde, megakaryocytische of monocytische lijnen, waardoor ze een veelzijdig model vormen voor het bestuderen van hematopoëtische differentiatie en de biologie van leukemie.

Door de introductie van groen fluorescerend eiwit (GFP) in K-562-cellen is realtime visualisatie en het volgen van het gedrag van leukemische cellen in vitro en in vivo mogelijk. K-562-GFP-cellen worden op grote schaal gebruikt in assays met betrekking tot celproliferatie, migratie en respons op geneesmiddelen, evenals in co-cultuursystemen om interacties met stromale of immuuncellen te bestuderen. De fluorescerende markering vergemakkelijkt toepassingen zoals flowcytometrie, live-celbeeldvorming en high-throughput screening.

Genetische modificatie: Stabiel gemodificeerd door replicatie-incompetente lentivirale transductie om de ZsGreen1-groene fluorescerende eiwitreporter tot expressie te brengen; in stand gehouden als een polyklonale populatie onder puromycineselectie (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-beveiligingsniveau.

Weefsel
Pleurale effusie
Ziekte
Chronische myeloïde leukemie

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Ophanging
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Lymfoblast-achtig
Celtype
Lymfoblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
K562-GFP (Cytion-catalogusnummer 305948)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Expressie en vatbaarheid

Antigeenexpressie
ZsGreen1 (groen fluorescerend eiwit)
Mutatieprofiel
Mutatie: p.Gln136fs*13, homozygoot

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiele Glutamine, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Geen
Heruitplanten
Onderhoud de culturen door het medium periodiek toe te voegen of te vervangen. Start de culturen met een dichtheid van 5 x 105 cellen/ml en houd de celconcentratie binnen het bereik van 3 x 105 tot 1 x 106 cellen/ml voor een optimale groei.
Zaaidichtheid
0,3 tot 1 × 10⁶ cellen/ml
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
53 jaar
Etnische afkomst
Kaukasisch