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K562-GFP
Gewebe
Pleuraerguss
Krankheit
Chronische myeloische Leukämie

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K562-GFP

Cell line · Artikelnummer 305948

K-562-GFP-Zellen sind eine genetisch veränderte Variante der menschlichen chronisch-myeloischen Leukämie (CML)-Zelllinie K-562, die ursprünglich aus dem peripheren...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

K-562-GFP-Zellen sind eine genetisch veränderte Variante der menschlichen chronisch-myeloischen Leukämie (CML)-Zelllinie K-562, die ursprünglich aus dem peripheren Blut eines erwachsenen Patienten in der Blastenkrise gewonnen wurde. Die Elternlinie K-562 ist durch das Vorhandensein des Philadelphia-Chromosoms gekennzeichnet, was zur Bildung des BCR-ABL-Fusionsproteins mit konstitutiver Tyrosinkinaseaktivität führt, das eine unkontrollierte Proliferation und das Überleben der Zellen antreibt. K-562-Zellen weisen Merkmale einer Erythroleukämie auf und können unter bestimmten experimentellen Bedingungen dazu gebracht werden, sich entlang der erythroiden, megakaryozytären oder monozytären Linie zu differenzieren, was sie zu einem vielseitigen Modell für die Untersuchung der hämatopoetischen Differenzierung und der Leukämiebiologie macht.

Die Einführung von grün fluoreszierendem Protein (GFP) in K-562-Zellen ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung und Verfolgung des Verhaltens von Leukämiezellen in vitro und in vivo. K-562-GFP-Zellen werden häufig in Assays zur Untersuchung von Zellproliferation, Migration und Arzneimittelansprechverhalten sowie in Kokultursystemen zur Untersuchung von Wechselwirkungen mit Stromazellen oder Immunzellen eingesetzt. Die Fluoreszenzmarkierung erleichtert Anwendungen wie Durchflusszytometrie, Live-Cell-Imaging und Hochdurchsatz-Screening.

Genetische Modifikation: Stabil modifiziert durch replikationsinkompetente lentivirale Transduktion zur Expression des grün fluoreszierenden Protein-Reporters ZsGreen1; wird als polyklonale Population unter Puromycin-Selektion (1–5 µg/ml) erhalten. Sicherheitsstufe S1/BSL-1.

Gewebe
Pleuraerguss
Krankheit
Chronische myeloische Leukämie

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Weiblich
Wachstumseigenschaften
Aussetzung
GVO-Status
GMO-S1
Angaben zum GVO-Status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Lymphoblasten-ähnlich
Zelltyp
Lymphoblasten

04Bezeichner

Quellenangabe
K562-GFP (Cytion-Katalognummer 305948)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Expression und Anfälligkeit

Antigenexpression
ZsGreen1 (grün fluoreszierendes Protein)
Mutationsprofil
Mutation: p.Gln136fs*13, homozygot

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Keine
Subkultivierung
Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
Aussaatdichte
0,3 bis 1 × 10⁶ Zellen/ml
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
53 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch