K562-GFP
Cell line · Artikelnummer 305948
K-562-GFP-Zellen sind eine genetisch veränderte Variante der menschlichen chronisch-myeloischen Leukämie (CML)-Zelllinie K-562, die ursprünglich aus dem peripheren...
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01Allgemeine Informationen
- Beschreibung
K-562-GFP-Zellen sind eine genetisch veränderte Variante der menschlichen chronisch-myeloischen Leukämie (CML)-Zelllinie K-562, die ursprünglich aus dem peripheren Blut eines erwachsenen Patienten in der Blastenkrise gewonnen wurde. Die Elternlinie K-562 ist durch das Vorhandensein des Philadelphia-Chromosoms gekennzeichnet, was zur Bildung des BCR-ABL-Fusionsproteins mit konstitutiver Tyrosinkinaseaktivität führt, das eine unkontrollierte Proliferation und das Überleben der Zellen antreibt. K-562-Zellen weisen Merkmale einer Erythroleukämie auf und können unter bestimmten experimentellen Bedingungen dazu gebracht werden, sich entlang der erythroiden, megakaryozytären oder monozytären Linie zu differenzieren, was sie zu einem vielseitigen Modell für die Untersuchung der hämatopoetischen Differenzierung und der Leukämiebiologie macht.
Die Einführung von grün fluoreszierendem Protein (GFP) in K-562-Zellen ermöglicht die Echtzeit-Visualisierung und Verfolgung des Verhaltens von Leukämiezellen in vitro und in vivo. K-562-GFP-Zellen werden häufig in Assays zur Untersuchung von Zellproliferation, Migration und Arzneimittelansprechverhalten sowie in Kokultursystemen zur Untersuchung von Wechselwirkungen mit Stromazellen oder Immunzellen eingesetzt. Die Fluoreszenzmarkierung erleichtert Anwendungen wie Durchflusszytometrie, Live-Cell-Imaging und Hochdurchsatz-Screening.
Genetische Modifikation: Stabil modifiziert durch replikationsinkompetente lentivirale Transduktion zur Expression des grün fluoreszierenden Protein-Reporters ZsGreen1; wird als polyklonale Population unter Puromycin-Selektion (1–5 µg/ml) erhalten. Sicherheitsstufe S1/BSL-1.
- Gewebe
- Pleuraerguss
- Krankheit
- Chronische myeloische Leukämie
02Klassifizierung
- Organismus
- Mensch
- Sex
- Weiblich
- Wachstumseigenschaften
- Aussetzung
- GVO-Status
- GMO-S1
- Angaben zum GVO-Status
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biologische Sicherheitsstufe
- 1
03Merkmale
- Morphologie
- Lymphoblasten-ähnlich
- Zelltyp
- Lymphoblasten
04Bezeichner
- Quellenangabe
- K562-GFP (Cytion-Katalognummer 305948)
- NCBI-Steuer-ID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_1G55
05Expression und Anfälligkeit
- Antigenexpression
- ZsGreen1 (grün fluoreszierendes Protein)
- Mutationsprofil
- Mutation: p.Gln136fs*13, homozygot
06Handhabung und Kultur
- Nährmedium
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
- Inkubationsatmosphäre
37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.
- Nahrungsergänzungsmittel
- Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
- Dissoziationsreagenz
- Keine
- Subkultivierung
- Halten Sie die Kulturen aufrecht, indem Sie regelmäßig Medium hinzufügen oder austauschen. Beginnen Sie die Kulturen mit einer Dichte von 5 x 105 Zellen/ml und halten Sie die Zellkonzentration im Bereich von 3 x 105 bis 1 x 106 Zellen/ml, um ein optimales Wachstum zu erzielen.
- Aussaatdichte
- 0,3 bis 1 × 10⁶ Zellen/ml
- Flüssigkeitswechsel
- 2 bis 3 Mal pro Woche
- Auftauen und Kultivierung
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung
- Gefriermedium
- Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir vollständiges Wachstumsmedium + 10 % DMSO, um eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen zu gewährleisten.
- Lagerbedingungen
Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.
- Versandbedingungen
Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.
08Spender
- Alter des Spenders
- 53 Jahre
- Ethnische Zugehörigkeit
- Kaukasisch
09Rechtliches und Sicherheit
- Sicherheitshinweise
- Wenn Sie planen, ein Kryovial in flüssigem Stickstoff zu lagern, um es später aufzutauen, müssen Sie strenge Sicherheitsmaßnahmen einhalten. Geeignete Schutzhandschuhe und -kleidung sind unerlässlich, und beim Transfer der gefrorenen Proben in den oder aus dem Flüssigstickstofftank ist das Tragen einer Gesichtsmaske oder einer Schutzbrille erforderlich. Damit soll die Verletzungsgefahr durch mögliche Explosionen der Kryovials bei der Entnahme, die zum Herausschleudern von scharfen Fragmenten führen können, verringert werden.
- Garantie
Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen
Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung
- Materialübertragungsvereinbarung erforderlich
- Ja
