İçeriğe atla
K562-GFP
Doku
Plevral efüzyon
Hastalık
Kronik miyeloid lösemi

K562-GFP

Cell line · Ürün numarası 305948

K-562-GFP hücreleri, aslen periferik kan kaynaklı insan kronik miyeloid lösemi (KML) hücre hattı K-562’nin genetik olarak değiştirilmiş bir varyantıdır...

€800.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

K-562-GFP hücreleri, başlangıçta blast krizinde olan bir yetişkin hastanın periferik kanından elde edilen insan kronik miyeloid lösemi (KML) hücre hattı K-562’nin genetik olarak değiştirilmiş bir varyantıdır. Ana K-562 hattı, Philadelphia kromozomunun varlığıyla karakterize edilir; bu da, kontrolsüz çoğalma ve hayatta kalmayı tetikleyen, konstitütif tirozin kinaz aktivitesine sahip BCR-ABL füzyon proteininin oluşmasına neden olur. K-562 hücreleri eritroleukemi özellikleri sergiler ve belirli deney koşulları altında eritroid, megakaryositik veya monositik soylar boyunca farklılaşmaya yönlendirilebilir; bu da onları hematopoietik farklılaşma ve lösemi biyolojisini incelemek için çok yönlü bir model haline getirir.

K-562 hücrelerine yeşil floresan proteininin (GFP) eklenmesi, in vitro ve in vivo ortamlarda lösemik hücre davranışının gerçek zamanlı olarak görüntülenmesini ve izlenmesini sağlar. K-562-GFP hücreleri, hücre çoğalması, göçü ve ilaç yanıtını içeren analizlerin yanı sıra, stromal veya immün hücrelerle etkileşimleri incelemek için ortak kültür sistemlerinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Floresan etiketleme, akış sitometrisi, canlı hücre görüntüleme ve yüksek verimli tarama gibi uygulamaları kolaylaştırır.

Genetik modifikasyon: ZsGreen1 yeşil floresan protein raportörünü eksprese etmek üzere replikasyon yeteneği olmayan lentiviral transdüksiyon yoluyla stabil bir şekilde modifiye edilmiştir; puromisin seleksiyonu (1–5 µg/mL) altında poliklonal bir popülasyon olarak muhafaza edilir. S1/BSL-1 güvenlik seviyesinde tutulur.

Doku
Plevral efüzyon
Hastalık
Kronik miyeloid lösemi

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Askıya alma
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Lenfoblast benzeri
Hücre türü
Lenfoblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
K562-GFP (Cytion katalog numarası 305948)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05İfade ve duyarlılık

Antijen ekspresyonu
ZsGreen1 (yeşil floresan protein)
Mutasyon profili
Mutasyon: p.Gln136fs*13, homozigot

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Yok
Alt kültür oluşturma
Kültürleri, besiyerini periyodik olarak ekleyerek veya değiştirerek muhafaza edin. Kültürleri 5 x 105 hücre/ml yoğunlukta başlatın ve optimal büyüme için hücre konsantrasyonunu 3 x 105 ila 1 x 106 hücre/ml aralığında tutun.
Ekim yoğunluğu
0,3 ila 1 x 10⁶ hücre/ml
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı + %10 DMSO kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
53 yıl
Etnik köken
Kafkas