Gå til innholdet
K562-GFP
Vev
Pleuraeffusjon
Sykdom
Kronisk myeloid leukemi

Dokumenter

K562-GFP

Cell line · Produktnummer 305948

K-562-GFP-celler er en genetisk modifisert variant av den humane cellelinjen K-562 for kronisk myelogen leukemi (CML), som opprinnelig stammer fra det perifere...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

K-562-GFP-celler er en genetisk modifisert variant av den humane cellelinjen K-562 for kronisk myelogen leukemi (CML), som opprinnelig stammer fra perifert blod fra en voksen pasient i blastkrise. Den opprinnelige K-562-linjen er preget av tilstedeværelsen av Philadelphia-kromosomet, noe som resulterer i BCR-ABL-fusjonsproteinet med konstitutiv tyrosinkinaseaktivitet, som driver ukontrollert proliferasjon og overlevelse. K-562-celler viser trekk ved erytroleukemi og kan under spesifikke eksperimentelle forhold induseres til å gjennomgå differensiering langs erytroide, megakaryocytiske eller monocytiske linjer, noe som gjør dem til en allsidig modell for å studere hematopoietisk differensiering og leukemibiologi.

Innføring av grønt fluorescerende protein (GFP) i K-562-celler muliggjør visualisering og sporing i sanntid av leukemiske cellers atferd in vitro og in vivo. K-562-GFP-celler brukes mye i analyser som omfatter celleproliferasjon, migrasjon og respons på legemidler, samt i samdyrkningssystemer for å studere interaksjoner med stromaceller eller immunceller. Den fluorescerende merkingen muliggjør anvendelser som strømningscytometri, avbildning av levende celler og screening med høy gjennomstrømning.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke det grønne fluorescerende proteinet ZsGreen1; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-inneslutning.

Vev
Pleuraeffusjon
Sykdom
Kronisk myeloid leukemi

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Oppheng
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Lymfoblastlignende
Celletype
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
K562-GFP (Cytion-katalognummer 305948)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Uttrykk og mottakelighet

Antigenuttrykk
ZsGreen1 (grønt fluorescerende protein)
Mutasjonsprofil
Mutasjon: p.Gln136fs*13, homozygot

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Ingen
Subkultivering
Oppretthold kulturene ved å tilsette eller skifte ut mediet med jevne mellomrom. Start kulturene med en tetthet på 5 x 105 celler/ml og hold cellekonsentrasjonen innenfor området 3 x 105 til 1 x 106 celler/ml for optimal vekst.
Såtetthet
0,3 til 1 × 10⁶ celler/ml
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium + 10 % DMSO for å sikre tilstrekkelig levedyktighet etter opptining.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
53 år
Etnisitet
Kaukasisk