Przejdź do treści
K562-GFP
Chusteczka
Wysięk opłucnowy
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa

Dokumenty

K562-GFP

Cell line · Numer produktu 305948

Komórki K-562-GFP stanowią genetycznie zmodyfikowaną odmianę ludzkiej linii komórkowej K-562, pochodzącej z przewlekłej białaczki szpikowej (CML), pierwotnie wyizolowanej z krwi obwodowej...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki K-562-GFP stanowią genetycznie zmodyfikowaną odmianę ludzkiej linii komórkowej K-562, pochodzącej z przewlekłej białaczki szpikowej (CML), pierwotnie wyizolowanej z krwi obwodowej dorosłego pacjenta w fazie kryzysu blastycznego. Macierzysta linia K-562 charakteryzuje się obecnością chromosomu Filadelfia, co skutkuje powstaniem białka fuzyjnego BCR-ABL o konstytutywnej aktywności kinazy tyrozynowej, która napędza niekontrolowaną proliferację i przeżycie komórek. Komórki K-562 wykazują cechy erytroleukemii i w określonych warunkach eksperymentalnych można je skłonić do różnicowania wzdłuż linii erytroidalnej, megakariocytowej lub monocytowej, co czyni je wszechstronnym modelem do badania różnicowania krwiotwórczego i biologii białaczki.

Wprowadzenie zielonego białka fluorescencyjnego (GFP) do komórek K-562 umożliwia wizualizację i śledzenie w czasie rzeczywistym zachowania komórek białaczkowych in vitro i in vivo. Komórki K-562-GFP są szeroko stosowane w testach dotyczących proliferacji komórek, migracji i odpowiedzi na leki, a także w systemach współhodowli do badania interakcji z komórkami zrębu lub komórkami odpornościowymi. Znakowanie fluorescencyjne ułatwia zastosowania takie jak cytometria przepływowa, obrazowanie żywych komórek oraz badania przesiewowe o wysokiej wydajności.

Modyfikacja genetyczna: Stabilnie zmodyfikowane poprzez transdukcję lentiwirusową bez zdolności do replikacji w celu ekspresji reporterowego białka zielonej fluorescencji ZsGreen1; utrzymywane jako populacja poliklonalna pod selekcją puromycyną (1–5 µg/mL). Poziom bezpieczeństwa S1/BSL-1.

Chusteczka
Wysięk opłucnowy
Choroba
Przewlekła białaczka szpikowa

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zawieszenie
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobne do limfoblastów
Typ komórki
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
K562-GFP (numer katalogowy Cytion 305948)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
ZsGreen1 (zielone białko fluorescencyjne)
Profil mutacji
Mutacja: p.Gln136fs*13, homozygotyczna

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Brak
Hodowla komórek w subkulturze
Kultury należy utrzymywać poprzez okresowe dodawanie lub wymianę pożywki. Kultury należy rozpocząć od gęstości 5 x 105 komórek/ml i utrzymywać stężenie komórek w zakresie od 3 x 105 do 1 x 106 komórek/ml, aby zapewnić optymalny wzrost.
Gęstość wysiewu
od 0,3 do 1 × 10⁶ komórek/ml
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
53 lata
Pochodzenie etniczne
Kaukaski