Pereiti prie turinio
K562-GFP
Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Lėtinė mieloidinė leukemija

Dokumentai

K562-GFP

Cell line · Prekės numeris 305948

K-562-GFP ląstelės yra genetiškai modifikuota žmogaus lėtinės mielogeninės leukemijos (CML) ląstelių linijos K-562 atmaina, iš pradžių gauta iš periferinių...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

K-562-GFP ląstelės yra genetiškai modifikuotas žmogaus lėtinės mielogeninės leukemijos (CML) ląstelių linijos K-562 variantas, iš pradžių gautas iš suaugusio paciento, patyrusio blastinę krizę, periferinio kraujo. Tėvinė K-562 linija pasižymi Filadelfijos chromosomos buvimu, dėl kurio susidaro BCR-ABL jungtinis baltymas su nuolatiniu tirozino kinazės aktyvumu, skatinančiu nekontroliuojamą proliferaciją ir išlikimą. K-562 ląstelės pasižymi eritroleukemijos požymiais ir tam tikromis eksperimentinėmis sąlygomis gali būti indukuotos diferencijuotis į eritroidines, megakariocitines arba monocitines ląstelių linijas, todėl jos yra universalus modelis kraujodaros diferenciacijai ir leukemijos biologijai tirti.

Įterpiant žalią fluorescuojantį baltymą (GFP) į K-562 ląsteles, galima realiuoju laiku stebėti ir sekti leukeminių ląstelių elgesį in vitro ir in vivo. K-562-GFP ląstelės plačiai naudojamos tyrimuose, susijusiuose su ląstelių proliferacija, migracija ir reakcija į vaistus, taip pat bendros kultūros sistemose, skirtose sąveikos su stromos ar imuninėmis ląstelėmis tyrimams. Fluorescencinis žymėjimas palengvina tokių metodų kaip srauto citometrija, gyvų ląstelių vaizdavimas ir didelio našumo atranka taikymą.

Genetinis modifikavimas: stabiliai modifikuotos replikacijos nesugebančiu lentivirusiniu transdukavimu, kad ekspresuotų žaliąjį fluorescuojantį baltymą „ZsGreen1“; išlaikomos kaip polikloninė populiacija, atrinkta puromicinu (1–5 µg/mL). S1/BSL-1 saugumo lygis.

Audinys
Pleuros išskyros
Liga
Lėtinė mieloidinė leukemija

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Pakaba
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į limfoblastus panašus
Ląstelių tipas
Limfoblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
K562-GFP (Cytion katalogo numeris 305948)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
ZsGreen1 (žaliasis fluorescuojantis baltymas)
Mutacijų profilis
Mutacija: p.Gln136fs*13, homozigotinis

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
RPMI 1640, š: 2,0 mM stabilus glutaminas, š: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820700a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Nėra
Subkultūrinis auginimas
Kultūras prižiūrėkite periodiškai papildydami arba keisdami terpę. Kultūras pradėkite su 5 x 105 ląstelių/ml tankiu ir, siekdami optimalaus augimo, palaikykite ląstelių koncentraciją nuo 3 x 105 iki 1 x 106 ląstelių/ml.
Sėjos tankis
0,3–1 x 10⁶ ląstelių/ml
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
53 metai
Etninė priklausomybė
Kaukaziečių