K562-GFP

Las células K-562-GFP son una variante modificada genéticamente de la línea celular K-562 de leucemia mielógena crónica (LMC) humana, derivada originalmente de la sangre periférica de un paciente adulto en crisis blástica. La línea parental K-562 se caracteriza por la presencia del cromosoma Filadelfia, lo que da lugar a la proteína de fusión BCR-ABL con actividad constitutiva de tirosina quinasa, que impulsa la proliferación y la supervivencia descontroladas. Las células K-562 presentan características de eritroleucemia y pueden ser inducidas a diferenciarse a lo largo de los linajes eritroide, megacariocítico o monocítico en condiciones experimentales específicas, lo que las convierte en un modelo versátil para estudiar la diferenciación hematopoyética y la biología de la leucemia.

La introducción de la proteína fluorescente verde (GFP) en las células K-562 permite visualizar y seguir en tiempo real el comportamiento de las células leucémicas tanto in vitro como in vivo. Las células K-562-GFP se utilizan ampliamente en ensayos relacionados con la proliferación celular, la migración y la respuesta a fármacos, así como en sistemas de cocultivo para estudiar las interacciones con células estromales o inmunitarias. El marcaje fluorescente facilita aplicaciones como la citometría de flujo, la obtención de imágenes de células vivas y el cribado de alto rendimiento.

Modificación genética: modificadas de forma estable mediante transducción con un lentivirus incapaz de replicarse para expresar el reportero de proteína fluorescente verde ZsGreen1; se mantienen como una población policlonal bajo selección con puromicina (1–5 µg/mL). Contención S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

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