Přejít na obsah
K562-GFP
Tkáň
Pleurální výpotek
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie

Dokumenty

K562-GFP

Cell line · Číslo výrobku 305948

Buňky K-562-GFP představují geneticky modifikovanou variantu buněčné linie K-562 lidské chronické myeloidní leukémie (CML), která byla původně odvozena z periferního...

€800.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky K-562-GFP představují geneticky modifikovanou variantu buněčné linie K-562 pocházející z lidské chronické myeloidní leukémie (CML), která byla původně izolována z periferní krve dospělého pacienta v blastické krizi. Mateřská linie K-562 se vyznačuje přítomností filadelfského chromozomu, což vede k tvorbě fúzního proteinu BCR-ABL s konstitutivní tyrozinkinázovou aktivitou, která řídí nekontrolovanou proliferaci a přežití buněk. Buňky K-562 vykazují znaky erytroleukémie a za specifických experimentálních podmínek lze u nich vyvolat diferenciaci do erytroidní, megakaryocytární nebo monocytární linie, což z nich činí univerzální model pro studium hematopoetické diferenciace a biologie leukémie.

Zavedení zeleného fluorescenčního proteinu (GFP) do buněk K-562 umožňuje vizualizaci a sledování chování leukemických buněk v reálném čase in vitro i in vivo. Buňky K-562-GFP se široce používají v testech zaměřených na buněčnou proliferaci, migraci a reakci na léčiva, stejně jako v systémech společné kultury ke studiu interakcí se stromálními nebo imunitními buňkami. Fluorescenční značení usnadňuje aplikace, jako je průtoková cytometrie, zobrazování živých buněk a vysoce výkonné screeningové testy.

Genetická modifikace: Stabilně modifikovány replikačně nekompetentní lentivirovou transdukcí k expresi reportéru zeleného fluorescenčního proteinu ZsGreen1; udržovány jako polyklonální populace pod selekcí puromycinem (1–5 µg/mL). Úroveň bezpečnosti S1/BSL-1.

Tkáň
Pleurální výpotek
Nemoc
Chronická myeloidní leukémie

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Odpružení
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblastům podobné
Typ buňky
Lymfoblasty

04Identifikátory

Citace
K562-GFP (katalogové číslo Cytion 305948)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1G55

05Exprese a náchylnost

Exprese antigenu
ZsGreen1 (zelený fluorescenční protein)
Mutační profil
Mutace: p.Gln136fs*13, homozygotní

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Žádný
Subkultivace
Kultury udržujte pravidelným přidáváním nebo výměnou média. Zahajte kultury s hustotou 5 x 105 buněk/ml a pro optimální růst udržujte koncentraci buněk v rozmezí 3 x 105 až 1 x 106 buněk/ml.
Hustota výsevu
0,3 až 1 × 10⁶ buněk/ml
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium + 10% DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
53 let
Etnická příslušnost
Kavkazský