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L6565
Tissu
Sang périphérique

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L6565

Cell line · Référence du produit 305189

Les cellules L6565 ont été isolées à partir de suspensions pancréatiques de splénocytes provenant de souris atteintes de leucémie L6565. Le nombre de chromosomes variait entre 38 et 144. La microscopie électronique...

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Recommandé (lot le plus récent)
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1

01Informations générales

Description

Les cellules L6565 proviennent de suspensions pancréatiques de splénocytes de souris atteintes de la leucémie L6565. Le nombre de chromosomes variait de 38 à 144. Les observations au microscope électronique ont révélé que les cellules clonales L6565 avaient des noyaux bien définis et une abondance d'organites et de particules virales de classe A et de classe C dans le cytoplasme. Les oncogènes c-myc et c-fos étaient surexprimés dans ces cellules. Le clone cellulaire L6565 est une lignée de cellules souches de leucémie lymphoblastique contenant un virus à ARN. Il a passé le test de détection des mycoplasmes dans cette bibliothèque.

L'importance de la lignée cellulaire L6565 réside dans le fait qu'elle fournit des ressources cellulaires expérimentales standardisées et un soutien technique associé pour la recherche dans les domaines des sciences de la vie et de la biotechnologie. Ces cellules peuvent être cruciales pour comprendre les mécanismes moléculaires de la leucémie, en particulier le rôle des particules virales et de l'expression des oncogènes dans la leucémogénèse. En outre, elles constituent un outil précieux pour l'essai et le développement de médicaments, permettant aux chercheurs d'explorer des stratégies thérapeutiques potentielles pour la leucémie et d'autres troubles connexes

Tissu
Sang périphérique

02Classification

Organisme
Souris
Propriétés de croissance
Adhérent et en suspension
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Lymphoblaste

04Identifiants

Référence
L6565 (numéro de catalogue Cytion 305189)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 0,005 mg/mL d'insuline, 0,01 mg/mL de transferrine humaine, 0,1 mM d'éthanolamine, 0,1 mM de phosphoéthanolamine, 25 nM de sélénium, 500 nM d'hydrocortisone, 0,005 mM de forskoline, extrait d'hypophyse bovine (0,15 mg de protéines par ml)
Repiquage
Homogénéisez délicatement la suspension cellulaire dans le flacon en pipettant de haut en bas, puis prélevez un échantillon représentatif afin de déterminer la densité cellulaire par ml. Diluez la suspension afin d'obtenir une concentration cellulaire de 5 x 105 cellules/ml avec un milieu de culture frais, puis répartissez la suspension ajustée dans de nouveaux flacons pour poursuivre la culture.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.