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L6565
Pañuelo de papel
Sangre periférica

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L6565

Cell line · Número de producto 305189

Las células L6565 se obtuvieron a partir de suspensiones pancreáticas de esplenocitos procedentes de ratones con leucemia L6565. El recuento cromosómico oscilaba entre 38 y 144. Microscopía electrónica...

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01Información general

Descripción

Las células L6565 procedían de suspensiones pancreáticas de esplenocitos de ratones con leucemia L6565. El recuento cromosómico oscilaba entre 38 y 144. Las observaciones al microscopio electrónico revelaron que las células clonales L6565 tenían núcleos bien definidos y abundancia de orgánulos y partículas víricas de clase A y clase C en el citoplasma. Los oncogenes c-myc y c-fos estaban sobreexpresados en estas células. El clon celular L6565 es una línea celular madre de leucemia linfoblástica que contiene virus ARN. Ha superado la prueba de detección de micoplasmas en esta biblioteca.

La importancia de la línea celular L6565 radica en que proporciona recursos celulares experimentales estandarizados y apoyo técnico asociado para la investigación en los campos de las ciencias de la vida y la biotecnología. Estas células pueden ser cruciales para comprender los mecanismos moleculares de la leucemia, en particular el papel de las partículas víricas y la expresión de oncogenes en la leucemogénesis. Además, constituyen una valiosa herramienta para el ensayo y desarrollo de fármacos, permitiendo a los investigadores explorar posibles estrategias terapéuticas para la leucemia y otros trastornos relacionados

Pañuelo de papel
Sangre periférica

02Clasificación

Organismo
Ratón
Propiedades de crecimiento
Adherente y en suspensión
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Linfoblasto

04Identificadores

Referencia
L6565 (número de catálogo 305189 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con 10% FBS, 0,005 mg/mL de insulina, 0,01 mg/mL de transferrina humana, 0,1 mM de etanolamina, 0,1 mM de fosfoetanolamina, 25 nM de selenio, 500 nM de hidrocortisona, 0,005 mM de forskolina, extracto de hipófisis bovina (0,15 mg de proteína por ml)
Subcultivo
Homogeneice suavemente la suspensión celular en el matraz pipeteando hacia arriba y hacia abajo, y luego tome una muestra representativa para determinar la densidad celular por ml. Diluya la suspensión para alcanzar una concentración celular de 5 x 105 células/ml con medio de cultivo fresco, y divida la suspensión ajustada en alícuotas en nuevos matraces para su posterior cultivo.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Descongelación y cultivo

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.