Премини към съдържанието
L6565
Тъкан
Периферна кръв

Документи

L6565

Cell line · Номер на продукта 305189

Клетките L6565 са получени от панкреатични суспензии на спленоцити от мишки с левкемия L6565. Броят на хромозомите варираше от 38 до 144. Електронномикроскопско...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките L6565 са получени от панкреасни суспензии на спленоцити от мишки с левкемия L6565. Броят на хромозомите варираше от 38 до 144. Електронномикроскопските наблюдения разкриват, че клонираните клетки L6565 имат добре дефинирани ядра и изобилие от органели и вирусни частици от клас А и клас С в цитоплазмата. Онкогените c-myc и c-fos са свръхекспресирани в тези клетки. Клетъчният клонинг L6565 е линия от стволови клетки на лимфобластна левкемия, съдържаща РНК-вирус. Тя е преминала успешно теста за откриване на микоплазма в тази библиотека.

Значението на клетъчната линия L6565 се състои в осигуряването на стандартизирани експериментални клетъчни ресурси и свързаната с тях техническа подкрепа за изследвания в областта на науките за живота и биотехнологиите. Тези клетки могат да бъдат от решаващо значение за разбирането на молекулярните механизми на левкемията, особено за ролята на вирусните частици и експресията на онкогени в левкемогенезата. Освен това те служат като ценен инструмент за тестване и разработване на лекарства, позволявайки на изследователите да проучат потенциални терапевтични стратегии за левкемия и други свързани с нея заболявания

Тъкан
Периферна кръв

02Класификация

Организъм
Мишка
Свойства, свързани с растежа
Адхезивен и суспензионен
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Лимфобласт

04Идентификатори

Източник
L6565 (каталожен номер на Cytion 305189)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_A9NB

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS, 0,005 mg/ml инсулин, 0,01 mg/ml човешки трансферин, 0,1 mM етаноламин, 0,1 mM фосфоетаноламин, 25 nM селен, 500 nM хидрокортизон, 0,005 mM форсколин, екстракт от хипофиза на говедата (0,15 mg протеин на ml)
Пресаждане
Нежно хомогенизирайте клетъчната суспензия в колбата чрез пипетиране нагоре и надолу, след което вземете представителна проба, за да определите клетъчната плътност на мл. Разредете суспензията, за да постигнете клетъчна концентрация от 5 x 105 клетки/мл с прясна културална среда, и разпределете коригираната суспензия в нови колби за по-нататъшно култивиране.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.