Przejdź do treści
L6565
Chusteczka
Krew obwodowa

Dokumenty

L6565

Cell line · Numer produktu 305189

Komórki L6565 uzyskano z zawiesin trzustkowych splenocytów pochodzących od myszy z białaczką L6565. Liczba chromosomów wahała się od 38 do 144. Mikroskopia elektronowa...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki L6565 uzyskano z zawiesin trzustkowych splenocytów myszy z białaczką L6565. Liczba chromosomów wahała się od 38 do 144. Obserwacje pod mikroskopem elektronowym wykazały, że klonalne komórki L6565 miały dobrze zdefiniowane jądra i obfitość organelli oraz cząstek wirusowych klasy A i C w cytoplazmie. Onkogeny c-myc i c-fos ulegały nadekspresji w tych komórkach. Klon komórkowy L6565 jest linią komórek macierzystych białaczki limfoblastycznej zawierającą wirus RNA. Przeszedł on test wykrywania mykoplazmy w tej bibliotece.

Znaczenie linii komórkowej L6565 polega na zapewnieniu znormalizowanych eksperymentalnych zasobów komórkowych i powiązanego wsparcia technicznego dla badań w dziedzinie nauk przyrodniczych i biotechnologii. Komórki te mogą mieć kluczowe znaczenie dla zrozumienia molekularnych mechanizmów białaczki, w szczególności roli cząstek wirusowych i ekspresji onkogenów w białaczce. Ponadto służą one jako cenne narzędzie do testowania i opracowywania leków, umożliwiając naukowcom badanie potencjalnych strategii terapeutycznych w przypadku białaczki i innych powiązanych zaburzeń

Chusteczka
Krew obwodowa

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Adhezja i zawiesina
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Limfoblast

04Identyfikatory

Źródło
L6565 (numer katalogowy Cytion 305189)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukozy, w: 2,5 mM L-glutaminy, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pirogronianu sodu, w: 1,2 g/l NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820400a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić pożywkę 10% FBS, 0,005 mg/ml insuliny, 0,01 mg/ml ludzkiej transferyny, 0,1 mM etanoloaminy, 0,1 mM fosfoetanoloaminy, 25 nM selenu, 500 nM hydrokortyzonu, 0,005 mM forskoliny, ekstrakt z przysadki bydlęcej (0,15 mg białka na ml)
Hodowla komórek w subkulturze
Delikatnie homogenizować zawiesinę komórek w kolbie, pipetując w górę i w dół, a następnie pobrać reprezentatywną próbkę w celu określenia gęstości komórek na ml. Rozcieńczyć zawiesinę świeżą pożywką, aby uzyskać stężenie komórek wynoszące 5 x 105 komórek/ml, a następnie podzielić dostosowaną zawiesinę na porcje w nowych kolbach w celu dalszej hodowli.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.