الانتقال إلى المحتوى
L6565
الأنسجة
الدم المحيطي

المستندات

L6565

Cell line · رقم المنتج 305189

تم استخلاص خلايا L6565 من معلق بنكرياسي لخلايا الطحال المأخوذة من فئران L6565 المصابة بسرطان الدم. وتراوح عدد الكروموسومات بين 38 و144. المجهر الإلكتروني...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تم اشتقاق خلايا L6565 من معلقات البنكرياس لخلايا الطحال من فئران سرطان الدم L656565. تراوح عدد الكروموسومات من 38 إلى 144. كشفت الملاحظات المجهرية الإلكترونية أن الخلايا النسيلية L6565 كانت تحتوي على نوى واضحة المعالم ووفرة من العضيات والجسيمات الفيروسية من الفئتين A و C في السيتوبلازم. تم الإفراط في التعبير عن الجينين الورميين c-myc وc-fos في هذه الخلايا. إن استنساخ الخلية L6565 هو خط خلايا جذعية لابيضاض الدم الليمفاوي الأرومي اللمفاوي المحتوي على فيروس الحمض النووي الريبي. وقد اجتاز اختبار الكشف عن الميكوبلازما في هذه المكتبة.

تكمن أهمية سلالة الخلايا L6565 في توفيرها لموارد الخلايا التجريبية الموحدة والدعم التقني المرتبط بها للأبحاث في مجالات علوم الحياة والتكنولوجيا الحيوية. يمكن أن تكون هذه الخلايا حاسمة لفهم الآليات الجزيئية لسرطان الدم، لا سيما دور الجزيئات الفيروسية والتعبير عن الجينات الورمية في تكوين سرطان الدم. بالإضافة إلى ذلك، فهي بمثابة أداة قيّمة لاختبار الأدوية وتطويرها، مما يسمح للباحثين باستكشاف الاستراتيجيات العلاجية المحتملة لسرطان الدم والاضطرابات الأخرى ذات الصلة

الأنسجة
الدم المحيطي

02التصنيف

كائن حي
الماوس
خصائص النمو
التثبيت والتعليق
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الأرومة اللمفاوية

04المعرّفات

المرجع
L6565 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305189)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_A9NB

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و0.005 ملغم/مل من الأنسولين، و0.01 ملغم/مل من الترانسفيرين البشري، و0.1 ملغم/مل من الإيثانولامين، و0.1 مل من الفوسفوإيثانولامين، و25 نانومتر من السيلينيوم، و500 نانومتر من الهيدروكورتيزون، و0.005 مل من الفوركولين، ومستخلص الغدة النخامية البقري (0.15 ملغم من البروتين لكل مل)
إعادة الاستنبات
قم بتجانس معلق الخلايا في القارورة برفق عن طريق السحب لأعلى ولأسفل باستخدام الماصة، ثم خذ عينة تمثيلية لتحديد كثافة الخلايا لكل مل. قم بتخفيف المعلق للحصول على تركيز خلايا يبلغ 5 × 105 خلية/مل باستخدام وسط استزراع جديد، وقم بتقسيم المعلق المعدل إلى قوارير جديدة لمزيد من الاستزراع.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.