Preskoči na vsebino
L6565
Tkivo
Periferna kri

Dokumenti

L6565

Cell line · Številka izdelka 305189

Celice L6565 so bile pridobljene iz suspenzij trebušne slinavke, ki so jih pridobili iz splenocitov miši z levkemijo L6565. Število kromosomov je znašalo od 38 do 144. Elektronska mikroskopija...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice L6565 so bile pridobljene iz pankreatičnih suspenzij splenocitov miši z levkemijo L6565. Število kromosomov je bilo od 38 do 144. Elektronsko mikroskopsko opazovanje je pokazalo, da so imele klonske celice L6565 dobro definirana jedra, v citoplazmi pa veliko organelov in virusnih delcev razreda A in C. Onkogena c-myc in c-fos sta bila v teh celicah prekomerno izražena. Klon celic L6565 je linija matičnih celic limfoblastne levkemije, ki vsebuje viruse RNK. V tej knjižnici je uspešno opravila test odkrivanja mikoplazme.

Pomen celične linije L6565 je v zagotavljanju standardiziranih eksperimentalnih celičnih virov in s tem povezane tehnične podpore za raziskave na področju znanosti o življenju in biotehnologije. Te celice so lahko ključne za razumevanje molekularnih mehanizmov levkemije, zlasti vloge virusnih delcev in izražanja onkogenov pri levkemogenezi. Poleg tega so dragoceno orodje za testiranje in razvoj zdravil, saj raziskovalcem omogočajo raziskovanje potencialnih terapevtskih strategij za levkemijo in druge sorodne bolezni

Tkivo
Periferna kri

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Lastnosti rasti
Adhezivni in suspenzijski
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Limfoblast

04Identifikatorji

Navajanje vira
L6565 (kataloška številka Cytion 305189)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 0,005 mg/ml inzulina, 0,01 mg/ml človeškega transferina, 0,1 mM etanolamina, 0,1 mM fosfoetanolamina, 25 nM selena, 500 nM hidrokortizona, 0,005 mM forskolina, ekstraktom goveje hipofize (0,15 mg beljakovin na ml)
Preusmeritev v drugo kulturo
Nežno homogenizirajte celično suspenzijo v kolbi s pipetiranjem navzgor in navzdol, nato odvzemite reprezentativni vzorec za določitev gostote celic na ml. Suspenzijo razredčite, da dosežete koncentracijo celic 5 x 105 celic/ml s svežim kultiviranim medijem, in prilagojeno suspenzijo razdelite v nove kolbe za nadaljnje gojenje.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.