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L6565
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末梢血

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L6565

Cell line · 製品番号 305189

L6565細胞は、L6565白血病マウスの脾細胞の膵臓懸濁液から樹立された。染色体数は38から144の範囲であった。電子顕微鏡...

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01概要

説明

L6565細胞はL6565白血病マウスの脾臓懸濁液から得られた。染色体数は38から144であった。電子顕微鏡で観察したところ、クローン化したL6565細胞は核が明瞭で、細胞質には小器官とクラスAおよびクラスCのウイルス粒子が豊富に存在していた。これらの細胞では癌遺伝子c-mycとc-fosが過剰発現していた。L6565細胞クローンはRNAウイルス含有リンパ芽球性白血病幹細胞株である。このライブラリーのマイコプラズマ検出テストに合格している。

L6565細胞株の意義は、生命科学とバイオテクノロジーの分野における研究のために、標準化された実験細胞資源と関連する技術サポートを提供することにある。これらの細胞は、白血病の分子メカニズム、特に白血病発生におけるウイルス粒子と癌遺伝子の発現の役割を理解する上で極めて重要である。さらに、白血病やその他の関連疾患に対する潜在的な治療戦略を研究者が探求することを可能にする、薬剤の試験や開発のための貴重なツールとしての役割も果たしている。

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末梢血

02分類

生物
マウス
成長特性
付着状態および浮遊状態
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
リンパ芽球

04識別子

引用
L6565（Cytion カタログ番号 305189）
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_A9NB

05取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に、10% FBS、0.005 mg/mL インスリン、0.01 mg/mL ヒトトランスフェリン、0.1 mM エタノールアミン、0.1 mM ホスホエタノールアミン、25 nM セレン、500 nM ヒドロコルチゾン、0.005 mM フォルスコリン、ウシ下垂体抽出物（1 ml あたり 0.15 mg タンパク質）を添加する。
継代培養
フラスコ内の細胞懸濁液をピペッティングにより上下に優しく均質化し、代表的なサンプルを採取して1mlあたりの細胞密度を測定する。新鮮な培養液で懸濁液を希釈し、細胞濃度を5×10⁵細胞/mlに調整した後、調整した懸濁液を新たなフラスコに分注し、さらなる培養を行う。
流体の更新
週2～3回
解凍と培養

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地（FBSを含む）＋10％DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。