Pāriet uz saturu
L6565
Audums
Perifērās asinis

Dokumenti

L6565

Cell line · Preces numurs 305189

L6565 šūnas tika iegūtas no L6565 leikēmijas pelēm izdalīto liesas šūnu aizkuņģa dziedzera suspensijām. Hromosomu skaits svārstījās no 38 līdz 144. Elektronmikroskopija...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

L6565 šūnas tika iegūtas no L6565 leikēmijas peļu pankreātisko leikēmijas suspensijas. Hromosomu skaits svārstījās no 38 līdz 144. Elektronmikroskopiskie novērojumi atklāja, ka klona L6565 šūnām bija labi definēti kodoli un daudz organellu un A un C klases vīrusu daļiņu citoplazmā. Šajās šūnās bija pārmērīga onkogēnu c-myc un c-fos ekspresija. L6565 šūnu klons ir RNS vīrusu saturoša limfoblastiskās leikēmijas cilmes šūnu līnija. Tā ir izturējusi mikoplazmas noteikšanas testu šajā bibliotēkā.

L6565 šūnu līnijas nozīme ir tā, ka tā nodrošina standartizētus eksperimentālo šūnu resursus un saistīto tehnisko atbalstu pētījumiem dzīvības zinātņu un biotehnoloģijas jomā. Šīm šūnām var būt izšķiroša nozīme, lai izprastu leikēmijas molekulāros mehānismus, jo īpaši vīrusu daļiņu un onkogēnu ekspresijas lomu leikemoģenēzē. Turklāt tās kalpo kā vērtīgs līdzeklis zāļu testēšanai un izstrādei, ļaujot pētniekiem izpētīt potenciālās leikēmijas un citu saistītu slimību terapeitiskās stratēģijas

Audums
Perifērās asinis

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Limfoblasts

04Identifikatori

Atsauce
L6565 (Cytion kataloga numurs 305189)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 0,005 mg/ml insulīna, 0,01 mg/ml cilvēka transferīna, 0,1 mM etanolamīna, 0,1 mM fosfoetanolamīna, 25 nM selēna, 500 nM hidrokortizona, 0,005 mM forskolin, liellopu hipofīzes ekstraktu (0,15 mg olbaltumvielu uz ml)
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 5 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.