Siirry sisältöön
L6565
Kudos
Perifeerinen veri

Asiakirjat

L6565

Cell line · Tuotenumero 305189

L6565-solut on eristetty L6565-leukemiahiirten pernasolujen haimasuspensioista. Kromosomien lukumäärä vaihteli välillä 38–144. Elektronimikroskooppitutkimus...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

L6565-solut johdettiin L6565-leukemiahiirten pernasolujen haimasuspensioista. Kromosomimäärä vaihteli 38:sta 144:ään. Elektronimikroskooppiset havainnot osoittivat, että kloonisilla L6565-soluilla oli hyvin määritellyt tumat ja sytoplasmassa runsaasti organelleja sekä A- ja C-luokan viruspartikkeleita. Onkogeenit c-myc ja c-fos yliekspressoitiin näissä soluissa. L6565-soluklooni on RNA-virusta sisältävä lymfoblastileukemian kantasolulinja. Se on läpäissyt mykoplasman havaitsemistestin tässä kirjastossa.

L6565-solulinjan merkitys on siinä, että se tarjoaa standardoituja kokeellisia soluresursseja ja niihin liittyvää teknistä tukea biotieteiden ja biotekniikan alan tutkimukselle. Nämä solut voivat olla ratkaisevan tärkeitä leukemian molekyylimekanismien ymmärtämisessä, erityisesti virushiukkasten ja onkogeenien ilmentymisen roolin ymmärtämisessä leukemogeneesissä. Lisäksi ne toimivat arvokkaana välineenä lääkkeiden testauksessa ja kehityksessä, jolloin tutkijat voivat tutkia mahdollisia terapeuttisia strategioita leukemiaa ja muita siihen liittyviä sairauksia varten

Kudos
Perifeerinen veri

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Kasvuominaisuudet
Adheesio ja suspensio
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Lymfoblastit

04Tunnisteet

Lähdeviite
L6565 (Cytion-tuotenumero 305189)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään väliaine 10 % FBS:llä, 0,005 mg/ml insuliinia, 0,01 mg/ml ihmisen transferriiniä, 0,1 mM etanoliamiinia, 0,1 mM fosfoetanoliamiinia, 25 nM seleeniä, 500 nM hydrokortisonia, 0,005 mM forskoliinia, naudan aivolisäkeuutetta (0,15 mg proteiinia millilitrassa)
Soluviljely
Homogenoi solususpensio varovasti pullossa pipetoimalla ylös ja alas, ota sitten edustava näyte solutiheyden määrittämiseksi millilitraa kohti. Laimenna suspensio tuoreella viljelyalustalla solupitoisuudeksi 5 x 105 solua/ml ja jaa säädetty suspensio uusiin pulloihin jatkokäsittelyä varten.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.