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L6565
Tecido
Sangue periférico

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L6565

Cell line · Número do produto 305189

As células L6565 foram obtidas a partir de suspensões pancreáticas de esplenócitos de ratos com leucemia L6565. A contagem cromossómica variou entre 38 e 144. Microscopia eletrónica...

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01Informações gerais

Descrição

As células L6565 foram derivadas de suspensões pancreáticas de esplenócitos de ratinhos com leucemia L6565. A contagem cromossómica variava entre 38 e 144. As observações de microscopia eletrónica revelaram que as células clonais L6565 tinham núcleos bem definidos e uma abundância de organelos e partículas virais de Classe A e Classe C no citoplasma. Os oncogenes c-myc e c-fos estavam sobre-expressos nestas células. O clone de células L6565 é uma linha de células estaminais de leucemia linfoblástica contendo vírus ARN. Passou o teste de deteção de micoplasma nesta biblioteca.

A importância da linha celular L6565 reside no facto de fornecer recursos celulares experimentais normalizados e apoio técnico associado para a investigação nos domínios das ciências da vida e da biotecnologia. Estas células podem ser cruciais para a compreensão dos mecanismos moleculares da leucemia, em particular o papel das partículas virais e da expressão do oncogene na leucemogénese. Além disso, constituem uma ferramenta valiosa para o ensaio e desenvolvimento de medicamentos, permitindo aos investigadores explorar potenciais estratégias terapêuticas para a leucemia e outras doenças relacionadas

Tecido
Sangue periférico

02Classificação

Organismo
Rato
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Linfoblasto

04Identificadores

Referência
L6565 (número de catálogo da Cytion 305189)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM:Ham's F12 (1:1), com: 3,1 g/L de glucose, com: 2,5 mM de L-Glutamina, com: 15 mM de HEPES, com: 0,5 mM de piruvato de sódio, com: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artigo Cytion 820400a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Suplementar o meio com 10% de FBS, 0,005 mg/mL de insulina, 0,01 mg/mL de transferrina humana, 0,1 mM de etanolamina, 0,1 mM de fosfoetanolamina, 25 nM de selénio, 500 nM de hidrocortisona, 0,005 mM de forskolina, extrato de hipófise bovina (0,15 mg de proteína por ml)
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 5 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.