Gå direkte til indholdet
L6565
Væv
Perifert blod

Dokumenter

L6565

Cell line · Varenummer 305189

L6565-cellerne stammer fra bugspytkirtelsuspensioner af miltceller fra L6565-leukæmi-mus. Kromosomtallet varierede fra 38 til 144. Elektronmikroskopi...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

L6565-celler stammer fra bugspytkirtelsuspensioner af splenocytter fra L6565-leukæmimus. Kromosomantallet varierede fra 38 til 144. Elektronmikroskopiske observationer viste, at de klonale L6565-celler havde veldefinerede kerner og en overflod af organeller og klasse A- og klasse C-viruspartikler i cytoplasmaet. Onkogenerne c-myc og c-fos var overudtrykt i disse celler. L6565-celleklonen er en RNA-virusholdig lymfoblastisk leukæmi stamcellelinje. Den har bestået mycoplasma-detektionstesten i dette bibliotek.

Betydningen af L6565-cellelinjen ligger i dens tilvejebringelse af standardiserede eksperimentelle celleressourcer og tilhørende teknisk support til forskning inden for biovidenskab og bioteknologi. Disse celler kan være afgørende for forståelsen af de molekylære mekanismer i leukæmi, især den rolle, som viruspartikler og onkogenekspression spiller i leukemogenese. Derudover fungerer de som et værdifuldt værktøj til testning og udvikling af lægemidler, så forskere kan udforske potentielle terapeutiske strategier for leukæmi og andre relaterede lidelser

Væv
Perifert blod

02Klassificering

Organisme
Mus
Vækstegenskaber
Adhæsion og suspension
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Lymfoblast

04Identifikatorer

Kildehenvisning
L6565 (Cytion-katalognummer 305189)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10 % FBS, 0,005 mg/ml insulin, 0,01 mg/ml humant transferrin, 0,1 mM ethanolamin, 0,1 mM phosphoethanolamin, 25 nM selen, 500 nM hydrocortison, 0,005 mM forskolin, bovint hypofyseekstrakt (0,15 mg protein pr. ml)
Oddyrkning
Homogeniser forsigtigt cellesuspensionen i kolben ved at pipettere op og ned, og tag derefter en repræsentativ prøve for at bestemme celletætheden pr. ml. Fortynd suspensionen til en cellekoncentration på 5 x 105 celler/ml med frisk dyrkningsmedium, og fordel den justerede suspension i nye kolber til videre dyrkning.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.