Přejít na obsah
L6565
Tkáň
Periferní krev

Dokumenty

L6565

Cell line · Číslo výrobku 305189

Buňky L6565 byly izolovány z pankreatických suspenzí splenocytů myší s leukémií typu L6565. Počet chromozomů se pohyboval v rozmezí od 38 do 144. Elektronová mikroskopie...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buňky L6565 byly odvozeny z pankreatických suspenzí splenocytů myší s leukémií L6565. Počet chromozomů se pohyboval od 38 do 144. Elektronmikroskopická pozorování odhalila, že klonální buňky L6565 měly dobře definovaná jádra a hojnost organel a virových částic třídy A a C v cytoplazmě. V těchto buňkách byly nadměrně exprimovány onkogeny c-myc a c-fos. Buněčný klon L6565 je linie kmenových buněk lymfoblastické leukemie obsahující RNA virus. V této knihovně prošla testem na detekci mykoplazmy.

Význam buněčné linie L6565 spočívá v tom, že poskytuje standardizované experimentální buněčné zdroje a související technickou podporu pro výzkum v oblasti přírodních věd a biotechnologií. Tyto buňky mohou mít zásadní význam pro pochopení molekulárních mechanismů leukémie, zejména úlohy virových částic a exprese onkogenů v leukemogenezi. Kromě toho slouží jako cenný nástroj pro testování a vývoj léků, který výzkumným pracovníkům umožňuje zkoumat potenciální terapeutické strategie pro leukémii a další příbuzné poruchy

Tkáň
Periferní krev

02Klasifikace

Organismus
Myš
Růstové vlastnosti
Adhezivní a suspenzní
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Lymfoblasty

04Identifikátory

Citace
L6565 (katalogové číslo Cytion 305189)
Daňové identifikační číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_A9NB

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium 10% FBS, 0,005 mg/ml inzulínu, 0,01 mg/ml lidského transferinu, 0,1 mM etanolaminu, 0,1 mM fosfoetanolaminu, 25 nM selenu, 500 nM hydrokortizonu, 0,005 mM forskolinu, extraktem z hovězí hypofýzy (0,15 mg proteinu na ml)
Subkultivace
Jemně homogenizujte buněčnou suspenzi v baňce pipetováním nahoru a dolů, poté odeberte reprezentativní vzorek pro stanovení buněčné hustoty na ml. Suspenzi zřeďte čerstvým kultivačním médiem tak, aby koncentrace buněk byla 5 x 105 buněk/ml, a upravenou suspenzi rozdělte do nových baňek pro další kultivaci.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.